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世界华人消化杂志. 2009-08-18; 17(23): 2338-2345
Published online 2009-08-18. doi: 10.11569/wcjd.v17.i23.2338
Published online 2009-08-18. doi: 10.11569/wcjd.v17.i23.2338
HBV S基因的反义锁核酸对乙型肝炎转基因小鼠HBV复制和表达的影响
邓益斌, 农乐根, 广西右江民族医学院附属医院医学检验中心 广西壮族自治区百色市 533000
王燕菲, 广东省广州医学院生物化学与分子生物学教研室 广东省广州市 510182
邓益斌, 讲师, 2009年广东省广州医学院硕士, 主要从事基因诊断与基因治疗研究.
基金项目: 广州市科技攻关基金资助项目, No. 2002Z3-E4081.
作者贡献分布: 该实验由邓益斌与王燕菲设计; 实验过程由邓益斌操作完成; 实验研究所需经费由王燕菲提供; 数据分析由邓益斌完成; 论文写作由邓益斌完成, 王燕菲与农乐根审校.
通讯作者: 王燕菲, 教授, 510182, 广东省广州市东风西路195号, 广州医学院生物化学与分子生物学教研室. yanfeiw@hotmail.com
电话: 020-81340212
收稿日期: 2009-05-16
修回日期: 2009-06-22
接受日期: 2009-06-29
在线出版日期: 2009-08-18
修回日期: 2009-06-22
接受日期: 2009-06-29
在线出版日期: 2009-08-18
Abstract
目的: 探讨乙型肝炎病毒(hepatitis B virus, HBV)S基因的反义锁核酸(LNA)对乙型肝炎转基因小鼠HBV复制和表达的影响.
方法: 将30只HBV转基因小鼠随机分为5组, 每组6只. 第1组为5% GLU液对照组, 第2组为空脂质体对照组, 第3组为单LNA组, 第4组为S-ASODN脂质体组, 第5组LNA脂质体组. 反义LNA经尾静脉注入小鼠体内, 采用ELISA法检测血清HBsAg; PCR定量检测血清HBV DNA含量; 免疫组织化学法检测肝细胞HBsAg的表达; 自动生化分析仪检测ALB、ALT、BUN、CR、ApoA1、ApoB等指标; 小鼠肝脏、肾脏做常规病理切片HE染色, 观察反义LNA对小鼠脏器的影响.
结果: 注射反义LNA 1 d、3 d、7 d、14 d后, LNA-脂质体组对血清HBsAg的表达抑制率分别为41.7%、52.8%、57.8%及30.5%. 对HBV DNA的抑制率分别为18.5%、36.1%、52.9%和32.7%, 与对照组比较均有显著性差异(P<0.05);全自动生化分析仪检测血清中ALB、ALT、BUN、CR、ApoA1、ApoB等指标, 各组结果与对照组比较均无显著性差异(P>0.05); 小鼠肝细胞HBsAg的表达显著低于对照组. HE染色显示小鼠肝肾功能及组织学未见异常.
结论: HBV S基因反义LNA对乙型肝炎病毒转基因鼠HBV复制和表达有显著抑制作用.
Keywords: 脂质体; 反义锁核酸; 乙型肝炎病毒; 小鼠; 转基因; 基因治疗