基础研究
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世界华人消化杂志. 2009-08-08; 17(22): 2231-2236
Published online 2009-08-08. doi: 10.11569/wcjd.v17.i22.2231
IL-10基因修饰骨髓源性肝干细胞移植对肝纤维化大鼠细胞外基质积聚的影响
兰玲, 陈源文, 孙超, 刘博伟, 孙巧玲
兰玲, 刘博伟, 河南省人民医院二内消化科 河南省郑州市 450003
陈源文, 孙超, 上海交通大学医学院附属新华医院消化内科 上海市 200092
孙巧玲, 上海交通大学医学院附属第六人民医院老年科 上海市 200233
兰玲, 2008年上海交通大学博士, 主治医师, 主要从事干细胞移植和肝纤维化防治研究.
基金项目: 国家自然科学基金资助项目, No. 30500236.
作者贡献分布: 此课题由陈源文与兰玲设计; 研究过程由兰玲、孙超及孙巧玲操作完成; 数据分析由兰玲与刘博伟完成; 本论文写作由兰玲完成.
通讯作者: 陈源文, 主治医师, 200092, 上海市控江路1665号, 上海交通大学医学院附属新华医院消化内科. shsmus@263.net
电话: 021-65790000-7104
收稿日期: 2009-04-06
修回日期: 2009-06-25
接受日期: 2009-06-29
在线出版日期: 2009-08-08
Abstract

目的: 评价IL-10基因修饰骨髓源性肝干细胞(BDLSCs)移植对肝纤维化大鼠细胞外基质(ECM)积聚的影响.

方法: 利用免疫磁珠细胞分选(magnetic bead cell sorting, MACS)方法分选大鼠β2m-/Thy-1+ BDLSCs. 将腺病毒介导的IL-10基因转导至BDLSCs, 采用ELISA法检测IL-10蛋白分泌水平. 将大鼠随机分为4组: 正常组、模型组、BDLSCs组及BDLSCs/IL-10组. 采用PCR法检测Y染色体性别决定基因Sry; 采用VG染色法观测肝组织胶原沉积面积; Western blot法检测肝组织α-平滑肌肌动蛋白(α-smooth muscle actin, α-SMA)表达; 采用碱水解法检测肝组织羟脯氨酸(hydroxyproline, Hyp)浓度; ELISA法检测血清透明质酸(HA)、层粘连蛋白(LN)和Ⅲ型前胶原(PCⅢ)等细胞外基质含量.

结果: MASC法能成功分选纯化BDLSCs. IL-10修饰BDLSCs持续高浓度分泌IL-10蛋白至胞外, 移植后能顺利种植于肝内, 减轻胶原沉积, 减少α-SMA表达从而抑制肝星状细胞活化, 与BDLSCs组比较, BDLSCs/IL-10组大鼠肝组织Hyp水平显著降低(255.0±50.5 μg/g vs 373.0±26.7 μg/g, P<0.01), 血清HA, LN及PCⅢ水平也有所降低, 差异具有统计学意义(40.5±7.7 μg/L vs 79.4±10.3 μg/L, 61.5±16.4 μg/L vs 77.7±12.6 μg/L, 14.3±0.8 μg/L vs 14.9±1.5 μg/L, P<0.01或0.05).

结论: IL-10基因修饰BDLSCs移植能有效减少肝纤维化大鼠ECM的积聚, 为治疗肝纤维化提供了新思路.

Keywords: 骨髓源性肝干细胞；白介素10；肝纤维化；细胞外基质