基础研究
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世界华人消化杂志. 2009-07-08; 17(19): 1942-1946
Published online 2009-07-08. doi: 10.11569/wcjd.v17.i19.1942
谷氧还蛋白1在高糖诱导的血管内皮细胞凋亡中的作用及其机制
于海涛, 张春晶, 岳丽玲, 于英君
于海涛, 张春晶, 岳丽玲, 齐齐哈尔医学院生物遗传教研室、生物化学与分子生物学教研室 黑龙江省齐齐哈尔市 161042
于英君, 黑龙江中医药大学生物化学与分子生物学教研室 黑龙江省哈尔滨市 150040
于海涛, 在读博士, 主要从事生物大分子功能研究.
基金项目: 黑龙江省自然基金项目资助, No. ZA2006-03; 黑龙江省教育厅面上项目基金资助, No. 11541407.
作者贡献分布: 此课题由于海涛与张春晶设计; 研究过程由于海涛、张春晶及岳丽玲操作, 于英君指导完成; 本论文写作由于海涛与张春晶完成.
通讯作者: 于海涛, 副教授, 161042, 黑龙江省齐齐哈尔市, 齐齐哈尔医学院. yht422@yahoo.com.cn
电话: 0452-2663711
收稿日期: 2009-03-04
修回日期: 2009-06-10
接受日期: 2009-06-18
在线出版日期: 2009-07-08
Abstract

目的: 观察谷氧还蛋白1(glutaredoxin1, Grx1)在高糖诱导的血管内皮细胞凋亡中的作用及机制.

方法: 在高糖环境中培养人脐静脉内皮细胞, 制备人脐静脉内皮细胞损伤模型. 细胞分为正常对照组、损伤组、Grx1预保护组. 倒置显微镜下观察细胞形态. MTT比色法检测细胞活力以初步观察Grx1对细胞损伤的作用; 采用Annexin V-FITC/PI 双染法, 流式细胞仪检测Grx1对人脐静脉内皮细胞凋亡的影响; 利用Western blot法分析Grx1对Akt、JNK蛋白水平表达的影响.

结果: Grx1预保护组与损伤组比较, 细胞状态明显改善. 与高糖损伤组比较, Grx1预保护组的细胞存活率显著提高(78%±3% vs 59%±2%, P<0.05), 早期凋亡率(0.2360%±0.0156% vs 0.4156%±0.0374%, P<0.05)和晚期凋亡率(0.2433%±0.0278% vs 0.3689%±0.0083%, P<0.05)均明显降低. 与正常对照组相比, 高糖组p-JNK相对含量明显增多(0.64±0.07 vs 0.48±0.03, P<0.05), 而高糖组p-Akt水平较正常对照组显著降低(1.29±0.035 vs 0.69±0.11, P<0.01). 同时, hGrx1保护后p-JNK蛋白水平较高糖组显著降低(0.39±0.05 vs 0.64±0.07, P<0.05); 而p-Akt蛋白水平较高糖组显著增高(0.69±0.11 vs 1.07±0.13, P<0.01).

结论: Grx1可通过抑制JNK激活及激活Akt通路来拮抗高糖诱导的内皮细胞凋亡.

Keywords: 谷氧还蛋白1; 高糖; 凋亡; 内皮细胞; 信号转导