Published online 2009-07-08. doi: 10.11569/wcjd.v17.i19.1936
修回日期: 2009-05-26
接受日期: 2009-06-08
在线出版日期: 2009-07-08
目的: 探讨左金丸及其主要单体成分在体内体外对大肠癌发生发展的干预作用.
方法: 培养人大肠癌细胞株HT29, 选择处于对数生长期的细胞, 分别用不同浓度的盐酸小檗碱(26.25、52.5、105、210、420 µmol/L)、吴茱萸碱(5、10、15、20、25、30 µmol/L)处理HT29细胞24、48、72、96 h, 筛选最适作用浓度与时间, 在这一浓度与时间作用下, 用活细胞计数法检测左金丸的主要单体成分小檗碱和吴茱萸碱对HT29细胞增殖的抑制作用, TRAP法检测HT29细胞端粒酶活性, 取HT29细胞, 用生理盐水制成单细胞悬液, 调整细胞浓度为5×105/0.2 mL, 注射于裸鼠左侧胁腹部皮下, 制作HT29细胞荷瘤裸鼠肿瘤模型. 随机将裸鼠分为4组: 对照组、左金丸组、AZT组和协同组, 观察左金丸和叠氮胸苷(AZT)对瘤体生长及端粒酶活性的影响. 利用致癌剂1, 2-二甲基酰肼(DMH, 25 mg/kg)诱导大鼠大肠癌模型, 同样随机将大鼠分为4组, 观察左金丸和AZT对大鼠大肠癌发生发展的干预作用.
结果: 在离体实验中, 处理24-72 h, 105 µmol/L盐酸小檗碱和15 µmol/L吴茱萸碱对HT29细胞增殖的抑制作用呈成正向的线性量效关系, 吴茱萸碱(7.5、15、30 µmol/L)作用后的抑制率分别为39.3%±2.13%, 52.8%±5.34%和64.1%±7.19%, 盐酸小檗碱(52.5、105、210 µmol/L)作用后的抑制率分别为44.1%±3.97%, 55.9%±4.12%和65.3%±6.94%. 105 µmol/L小檗碱和15 µmol/L吴茱萸碱处理HT29细胞72 h, 小檗碱和吴茱萸碱可以有效抑制HT29细胞端粒酶的活性. 在荷瘤裸鼠实验中, 左金丸和AZT对瘤体大小无明显影响, 对端粒酶活性有微弱影响. 第11周, 对照组、左金丸组、AZT组和协同组大鼠肿瘤发生率分别为20%、0%, 10%和10%, 左金丸作用优于AZT, 但34 wk各组间无明显差异.
结论: 离体实验中, 左金丸的主要成分可以有效抑制HT29细胞的增殖和端粒酶的活性; 裸鼠移植瘤实验中, 观察不到左金丸的药效; 1, 2-DMH诱导大肠癌实验模型中, 左金丸可以有效阻碍早期癌症的发生和发展.