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世界华人消化杂志. 2009-06-18; 17(17): 1759-1763
Published online 2009-06-18. doi: 10.11569/wcjd.v17.i17.1759
Published online 2009-06-18. doi: 10.11569/wcjd.v17.i17.1759
DMBT1过表达对食管癌细胞系EC9706生物学行为的影响
张光斌, 安阳市肿瘤医院放疗一科 河南省安阳市 455000
贺涛, 复旦大学附属中山医院普外科 上海市 200032
张宁, 郑州大学第一附属医院儿外科 河南省郑州市 450052
作者贡献分布: 此课题由贺涛与张宁设计, 并参与实验结果数据的整理分析, 研究过程及论文写作主要由张光斌完成.
通讯作者: 张光斌, 450052, 河南省安阳市洹滨北路2号, 安阳市肿瘤医院放疗一科. z1026n@163.com
电话: 0372-2232090
收稿日期: 2009-04-08
修回日期: 2009-05-15
接受日期: 2009-05-25
在线出版日期: 2009-06-18
修回日期: 2009-05-15
接受日期: 2009-05-25
在线出版日期: 2009-06-18
Abstract
目的: 建立稳定表达候选抑癌基因DMBT1的食管癌细胞系EC9706, 并分析转染前后其增殖特点、转移侵袭能力的变化.
方法: 脂质体介导法将DMBT1的全长表达质粒转染食管癌细胞系EC9706, G418筛选阳性克隆细胞, Western blot及RT-PCR检测DMBT1蛋白及mRNA水平变化, MTT法绘制细胞生存曲线及无血清条件下测细胞生存抑制率, Transwell实验检测细胞趋化迁移能力变化.
结果: 通过稳定转染后, DMBT1蛋白水平及mRNA水平均比对照组提高3.2倍以上, 与对照组比较, 差异有显著意义(P<0.01); 实验组细胞增殖速度、倍增时间、对数生长期等均比对照组细胞更为缓慢, 在无血清培基中增殖抑制率随时间延长不断增高, 实验组迁移细胞数为206±25, 对照组为367±42, 2组比较差异有显著意义(P<0.01).
结论: 在体外成功建立稳定表达DMBT1的细胞系, DMBT1过表达在体外显著抑制食管癌细胞系EC9706的生长增殖及趋化迁移.
Keywords: 脑恶性肿瘤缺失基因1; 稳定转染; 食管癌