临床经验
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世界华人消化杂志. 2009-06-08; 17(16): 1672-1675
Published online 2009-06-08. doi: 10.11569/wcjd.v17.i16.1672
肝纤维化患者血清差异蛋白质的筛选
罗新华, 程明亮, 杨勤, 张权
罗新华, 贵州省人民医院感染科 贵州省贵阳市 550002
程明亮, 杨勤, 张权, 贵阳医学院附属医院感染科 贵州省贵阳市 550004
基金项目: 贵州省优秀青年科技人才基金资助项目, No. 2005-0518; 贵阳医学院研究生创新计划基金资助项目, No. b200705; 贵州省卫生厅科技基金资助项目, No. 2006038.
作者贡献分布: 罗新华与程明亮对此文所作贡献均等; 此课题由罗新华与程明亮设计; 研究过程由罗新华与杨勤操作完成; 研究所用新试剂及分析工具由程明亮提供; 数据分析由罗新华与张权完成; 本论文写作由罗新华与程明亮共同完成.
通讯作者: 程明亮, 550004, 贵州省贵阳市贵医街28号, 贵阳医学院附属医院感染科. chengml@21cn.com
电话: 0851-6752795 传真: 0851-6752695
收稿日期: 2009-03-17
修回日期: 2009-04-10
接受日期: 2009-04-20
在线出版日期: 2009-06-08
Abstract

目的: 对比分析肝纤维化患者和健康人血清中差异表达的蛋白质, 筛选与肝纤维化发生密切相关的血清蛋白质.

方法: 肝纤维化患者和健康人空腹血清标本各6例分别等量混合成2个样本, 去除血清中的白蛋白和IgG. 利用双向凝胶电泳(2-DE)分离肝纤维化血清和健康人血清总蛋白质后, 硝酸银染色, 经图像分析筛选差异表达的蛋白点. 应用基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(MALDI-TOF-MS)鉴定差异表达的蛋白点, 并用ELISA法对其中部分差异蛋白的表达水平进行验证.

结果: 筛选出2组间的差异蛋白点共517个, 对其中表达量差异3倍以上的24个蛋白点进行MALDI-TOF-MS分析, 鉴定出包括触珠蛋白、载脂蛋白A-Ⅳ、转铁蛋白、T细胞受体β链、血清白蛋白及血清白蛋白前体等8个蛋白质, 其中3个蛋白质在肝纤维化血清中表达上调, 5个蛋白质在肝纤维化血清中表达下调. 与健康人血清比较, ELISA法检测肝纤维化血清中触珠蛋白、载脂蛋白A-Ⅳ表达均下调, 结果与双向凝胶电泳一致.

结论: 肝纤维化血清与健康人血清的蛋白质表达谱表现出一定差异, 这些差异表达的血清蛋白质有望成为肝纤维化诊断与判定预后的血清标志物.

Keywords: 肝纤维化; 血清; 蛋白质组学