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世界华人消化杂志. 2009-05-08; 17(13): 1350-1354
Published online 2009-05-08. doi: 10.11569/wcjd.v17.i13.1350
Published online 2009-05-08. doi: 10.11569/wcjd.v17.i13.1350
抗体可以作为半抗原二硝基氟苯免疫靶向治疗的载体
何晓俊, 金坛市人民医院内科 江苏省金坛市 214300
储艳秋, 蒋公羽, 复旦大学化学系 上海市 200433
戴兆云, 复旦大学附属华东医院消化科 上海市 200040
基金项目: 上海市中医肝病基金资助项目, No. SH-ZXYJH2005-004.
通讯作者: 戴兆云, 上海市延安西路221号, 200040, 复旦大学附属华东医院消化科. daizhaoyun1@yahoo.com.cn
电话: 021-62483180-80201
收稿日期: 2008-12-24
修回日期: 2009-01-22
接受日期: 2009-02-09
在线出版日期: 2009-05-08
修回日期: 2009-01-22
接受日期: 2009-02-09
在线出版日期: 2009-05-08
Abstract
目的: 了解半抗原二硝基氟苯(DNFB)结合乙型肝炎免疫球蛋白(HBIG)后对其抗体功能的影响.
方法: 常温下把HBIG(13 mg/500 µL PBS)水溶液分别与不同剂量(2、4、8 mg)的DNFB混合, 组成2、4、8 mg管, 混匀过夜后离心. 取2、4 mg管及未加DNFB的HBIG水溶液对照管, 各取半量对半稀释, 以HiTrap分子筛柱脱盐, 3个洗脱液再分别作对半系列稀释11次, 3组共组成36个标本. ELISA法检测乙肝表面抗体的效价. 取2、4 mg管的另一半分别予饱和硫酸铵沉淀后取上清, 以紫外光光度分析仪测定A340, 与加入不同剂量DNFB的5个系列浓度作内标的对照管上清相比较, 计算相应管中HBIG结合掉的DNFB量.
结果: 2、4 mg管及对照组, 经双因素方差分析及q检验, 三组间同稀释度间吸光差值(A450-A630)无差异, 而各稀释度间则有非常显著差异(P<0.01). 饱和硫酸铵沉淀结合分光光度法测定证实2、4 mg管中6.5 mg HBIG分别结合DNFB 0.67 mg和0.86 mg, 即每一个HBIG分子分别结合88.72及113.48个DNFB半抗原分子, 约占HBIG氨基酸残基的6.12%和7.86%.
结论: 免疫球蛋白(抗体)可作为半抗原DNFB免疫靶向治疗慢性病毒感染或肿瘤的一种有效载体.
Keywords: 乙型肝炎免疫球蛋白; 二硝基氟苯; 靶向治疗; 抗HBs; 半抗原