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世界华人消化杂志. 2009-05-08; 17(13): 1346-1349
Published online 2009-05-08. doi: 10.11569/wcjd.v17.i13.1346
Published online 2009-05-08. doi: 10.11569/wcjd.v17.i13.1346
siRNA沉默Livin基因对胃癌细胞生长、凋亡的影响
陈鹏, 王春松, 山东大学医学院 山东省济南市 275012
孔令斌, 济宁医学院 山东省济宁市 272013
杨景玉, 山东省寄生虫病防治所 山东省济宁市 272033
基金项目: 山东省教育厅基金资助项目, No. J08LH03.
作者贡献分布: 本论文写作由陈鹏完成; 孔令斌完成实验设计、项目申请及论文审阅指导; 王春松进行试验及数据分析; 杨景玉完成行政、技术及材料支持、指导论文修改.
通讯作者: 孔令斌, 272013, 山东省济宁市, 济宁医学院. klb3904@163.com
收稿日期: 2008-11-04
修回日期: 2009-01-06
接受日期: 2009-01-12
在线出版日期: 2009-05-08
修回日期: 2009-01-06
接受日期: 2009-01-12
在线出版日期: 2009-05-08
Abstract
目的: 观察小分子干扰RNA(siRNA)沉默Livin基因在胃癌BGC-823细胞中的表达, 并探讨Livin基因对胃癌细胞生长、凋亡的影响.
方法: 自行设计两条针对Livin基因的siRNA: Livin-sh-1和Livin-sh-2, 以此构建相应的表达载体并分别转染至对数生长期胃癌BGC-823细胞, 经G418筛选后分别采用半定量RT-PCR检测不同siRNA实验分组细胞BGC-823 mRNA水平变化, 四氮唑盐比色法(MTT)检测细胞增殖、流式细胞仪检测胃癌细胞的凋亡.
结果: siRNA对照组与空siRNA载体组Livin α/β mRNA表达差别无显著性; 但转染siRNA组Livin α/β mRNA表达显著低于空白对照组和空siRNA载体组(Livin α: 0.11±0.07 vs 0.37±0.10, 0.34±0.08; Livin β: 0.13±0.04 vs 0.43±0.09, 0.45±0.11, 均P<0.05). 空白对照组与空siRNA载体组相比, 24、48、96 h和1 wk时细胞生长未受影响; 而siRNA组在转染后24 h和48 h细胞生长未受影响, 但在96 h和1 wk时则被明显抑制(P<0.01). 转染siRNA组的细胞的凋亡率与空白对照组和转染空siRNA载体组相比显著增加(14.85%±1.35% vs 4.51%±0.36%, 6.13%±0.71%, 均P<0.05).
结论: siRNA沉默Livin基因能抑制胃癌细胞的生长, 促进胃癌细胞的凋亡, Livin基因有可能成为胃癌治疗的新靶点.
Keywords: 小分子干扰RNA; Livin基因; 胃癌