基础研究
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世界华人消化杂志. 2009-04-18; 17(11): 1098-1102
Published online 2009-04-18. doi: 10.11569/wcjd.v17.i11.1098
幽门螺杆菌中国临床分离株iceA基因突变株的构建和鉴定
马一君, 段广才, 张荣光, 范清堂, 张卫东
马一君, 段广才, 张荣光, 张卫东, 郑州大学公共卫生学院流行病学教研室 河南省郑州市 450001
马一君, 河南中医学院基础医学院 河南省郑州市 450008
段广才, 范清堂, 河南省分子医学重点学科开放实验室 河南省郑州市 450052
马一君, 郑州大学公共卫生学院在读博士, 主要从事幽门螺杆菌分子流行病学研究.
作者贡献分布: 此课题由段广才与马一君设计; 研究过程由马一君、张荣光操作完成; 研究所用仪器及分析工具等由范清堂提供; 数据分析由马一君、张荣光及张卫东完成; 本论文写作由马一君完成, 段广才审核修改.
通讯作者: 段广才, 450001, 河南省郑州市, 郑州大学公共卫生学院流行病学教研室. gcduan@public.zz.ha.cn
电话: 0371-67781964
收稿日期: 2009-01-06
修回日期: 2009-02-21
接受日期: 2009-02-23
在线出版日期: 2009-04-18
Abstract

目的: 构建幽门螺杆菌(H. pylori)iceA基因突变株.

方法:  克隆iceA基因及两侧的部分序列至载体pBluescript SKⅡ(-)多克隆位点中. 运用基因重组方法将卡那霉素抗性基因(kam)插人iceA基因片段之间, 构建出带卡那霉素抗性标志的突变载体pBS-iceA-kam. 再将突变载体转化至H. pylori中国临床分离株MEL-H. pylori 27中, 用卡那霉素筛选iceA基因的突变株, 经PCR和DNA测序鉴定.  

结果: 用PCR方法扩增突变株基因组DNA, 结果显示卡那霉素抗性基因已插入iceA基因片段中, 测序进一步证实已筛选获得H. pylori中国临床分离株iceA基因的突变株.

结论:  成功构建一株H. pylori iceA基因突变株.

Keywords: 幽门螺杆菌; iceA基因; 突变株