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乙型肝炎病毒促进CTGF和TGF-β1在肝星状细胞中的表达
哈明昊, 饶慧瑛, 刘峰, 潘孝本, 封波, 陈红松, 魏来, 北京大学肝病研究所 北京市 100044
哈明昊, 广东省东莞市人民医院 广东省东莞市 523000
哈明昊, 2007年北京大学医学部博士, 主治医师, 主要从事内科肝病的临床和科研工作.
基金项目: 国家十五科技攻关计划资助项目, No. 2004BA718B10.
作者贡献分布: 哈明昊与魏来对此文所作贡献均等; 此课题由魏来与哈明昊设计; 研究过程由哈明昊, 饶慧瑛, 刘峰, 潘孝本及封波操作完成; 研究所用新试剂及分析工具由陈红松提供; 数据分析由哈明昊, 饶慧瑛及刘峰完成; 本论文写作由哈明昊与魏来完成.
通讯作者: 魏来, 100044, 北京市西直门南大街11号, 北京大学人民医院肝病研究所. weelai@163.com
电话: 010-88325566
收稿日期: 2007-12-24
修回日期: 2008-02-26
接受日期: 2008-03-08
在线出版日期: 2008-03-28
修回日期: 2008-02-26
接受日期: 2008-03-08
在线出版日期: 2008-03-28
Abstract
目的: 研究转染乙型肝炎病毒(HBV)的HepG2.2.15细胞株在体外促进肝星状细胞中CTGF和TGF-β1的表达, 进而探讨HBV促肝细胞纤维化的机制.
方法: 将HepG2和HepG2.2.15细胞株分别在体外与肝星状细胞(LX-2)共培养, 以单独培养的肝星状细胞为对照组. 培养24, 48, 72 h后, 以Real-time PCR定量检测肝星状细胞中CTGF和TGF-β1 mRNA的表达, 以Western blot定量检测其蛋白表达.
结果: 与对照组比较, 在24、48、72 h时点, CTGF和TGF-β1 mRNA分别增高约1.7、4.2、9.6倍(P<0.05)和2.2、6.1、8.1倍(P<0.01), 以72 h差异最为显著; 而与HepG2细胞共培养实验组LX-2细胞CTGF和TGF-β1 mRNA在三个时间点分别增高约1.7、1.2、1.3倍(P<0.05)和2.7、1.9、2.1倍(P<0.05). CTGF和TGF-β1蛋白表达量分别增高约2.1、2.6、2.5倍(P<0.05)和1.7、3.3、3.1倍(P<0.01), 以48 h差异最为显著; 而与HepG2细胞共培养实验组LX-2细胞CTGF和TGF-β1蛋白表达量在三个时间点分别增高约1.6、1.1、0.9倍(P<0.05)和1.1、1.4、2.5倍(P<0.05).
结论: 与HepG2.2.15细胞株共培养后, 肝星状细胞中肝纤维化相关因子的表达明显增强. 体外实验证明HBV具有诱导肝细胞纤维化的重要作用.
Keywords: 乙型肝炎病毒; 肝纤维化; 细胞共培养; 结蒂组织生长因子; 转化生长因子β1