Copyright
©The Author(s) 2008. Published by Baishideng Publishing Group Inc. All rights reserved.
逆转录病毒介导增强型绿色荧光蛋白基因在大鼠骨髓间充质干细胞中的表达
曾智凤, 易著文, 何庆南, 吴小川, 党西强, 何小解, 莫双红, 中南大学湘雅二医院小儿肾脏病研究室 湖南省长沙市 410011
基金项目: 国家自然科学基金资助项目, No. 30672251.
作者贡献分布: 曾智凤与易著文对此文所作贡献均等; 此课题由易著文, 曾智凤设计; 研究过程由曾智凤, 何庆南, 吴小川, 党西强, 何小解及莫双红操作完成; 论文撰写由曾智凤, 易著文完成.
通讯作者: 易著文, 410011, 湖南省长沙市人民中路139号, 中南大学湘雅二医院小儿肾脏病研究室. yizhuwen@yahoo.com.cn
电话: 0731-5292170
收稿日期: 2007-10-30
修回日期: 2008-03-03
接受日期: 2008-03-08
在线出版日期: 2008-03-28
修回日期: 2008-03-03
接受日期: 2008-03-08
在线出版日期: 2008-03-28
Abstract
目的: 观察逆转录病毒介导绿色荧光蛋白基因在SD大鼠骨髓间充质干细胞(bone marrow stromal cells, BMSCs)中的表达, 为干细胞移植机制的研究提供基础.
方法: 采用密度梯度离心法分离培养BMSCs, 诱导培养液诱导其向成脂肪方向分化, 行细胞表面抗原鉴定, 及油红O染色评价细胞成脂肪情况. 在此基础上, 采用逆转录病毒pLEGFP-N1对细胞进行荧光蛋白标记, 观察细胞形态学改变荧光表达的时间与强度, 计算转染率.
结果: 细胞扩增迅速, 形态良好, 纯度较高, 经诱导后细胞内可见脂滴. 逆转录病毒载体pLEGFP-N1成功标记SD大鼠骨髓间充质干细胞, 并对4 wk体外培养进行了良好的标记.
结论: 逆转录病毒pLEGFP-N1转染效率高, 转染成功的BMSCs可以长期稳定表达目的基因, 是一种理想的病毒载体.
Keywords: 骨髓基质干细胞; 成脂肪诱导; 增强型绿色荧光蛋白; 逆转录病毒; 转染