Ss-A/Ro 60 ku亚单位变异体1在胃癌多药耐药中的作用

Abstract

目的: 对Ro 60变异体1在胃癌多药耐药中的功能进行研究.

方法:  克隆Ro 60变异体1编码基因, 构建Ro 60变异体1编码基因的正义真核表达载体, 将其转导入SGC7901细胞, 应用半定量RT-PCR技术, 对基因转染细胞进行鉴定, 通过MTT法进行体外药物敏感性分析, 借助流式细胞仪检测细胞内蓄积的阿霉素.  

结果: 成功构建Ro 60变异体1正义真核表达载体; 应用脂质体介导法将其转导入SGC7901, 其表达量明显增加; 体外药物敏感性试验提示, 与SGC7901和SGC7901-pcDNA3.1细胞相比, 转染细胞对长春新碱(IC₅₀: 2.87±0.10 mg/L vs 0.47±0.07 mg/L, 0.63±0.08 mg/L, P<0.01)、5-氟尿嘧啶(IC₅₀: 3.89±0.12 mg/L vs 0.59±0.17 mg/L, 0.92±0.12 mg/L, P<0.01)、丝裂霉素(IC₅₀: 1.02±0.06 mg/L vs 0.50±0.04 mg/L, 0.73±0.09 mg/L, P<0.05)、顺铂(IC₅₀: 1.15±0.06 mg/L vs 0.46±0.04 mg/L, 0.52±0.05 mg/L, P<0.01)、阿霉素(IC₅₀: 0.45±0.03 mg/L vs 0.15±0.03 mg/L, 0.16±0.02 mg/L, P<0.01)的敏感性减低; 流式细胞仪检测结果显示, 转染细胞内阿霉素的蓄积减少(50.39±2.09 mg/L vs 94.99±4.07 mg/L, 88.06±2.67 mg/L, P<0.01).

结论:  Ro 60变异体1真核表达载体转染SGC7901细胞后, 显示多药耐药特性.

Keywords: 胃癌; Ss-A/Ro 60 ku亚单位; 变异体; 多药耐药; 基因转染