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黄芩甙对肝癌细胞BEL-7402线粒体膜电位、细胞内Ca2+和Cyt C的影响
郭霞, 河北医科大学第四医院 河北省石家庄市 050011
郭昱, 河北医科大学第二医院 河北省石家庄市 050000
郭霞, 副主任医师, 主要从事肝癌的中医药研究.
作者贡献分布: 郭霞与郭昱对此文所作贡献均等; 此课题由郭霞和郭昱设计; 研究过程由郭霞、郭昱共同操作完成; 研究所用新试剂及分析工具由郭昱提供; 数据分析由郭昱完成; 本论文写作由郭霞、郭昱完成.
通讯作者: 郭昱, 050000, 河北省石家庄市, 河北医科大学第二医院. guoyu123123@sina.com
电话: 0311-66002951
收稿日期: 2007-10-09
修回日期: 2008-01-15
接受日期: 2008-01-23
在线出版日期: 2008-02-18
修回日期: 2008-01-15
接受日期: 2008-01-23
在线出版日期: 2008-02-18
Abstract
目的: 探讨线粒体损伤在黄芩甙诱导肝癌细胞凋亡中的作用及可能的机制.
方法: 应用细胞培养技术培养肝癌细胞BEL-7402, 透射电镜观察线粒体的变化; 应用流式细胞仪检测细胞凋亡百分率及线粒体膜电位、细胞内Ca2+的改变, 荧光发光法检测细胞色素(cytochrome C, Cyt C)含量, Bcl-2蛋白表达和流式细胞仪测定caspase-3活性.
结果: 黄芩甙诱导肝癌细胞BEL-7402凋亡呈剂量依赖关系, 线粒体结构出现明显改变; 肝癌细胞线粒体膜电位降低, 6 h、24 h、48 h分别为85.49±2.17、82.59±2.18、28.45±2.39; 细胞内Ca2+和Cyt C的释放增加, Bcl-2蛋白表达下降和caspase-3活性增加. 在6 h、24 h、48 h时细胞线粒体膜电位, 细胞内Ca2+和Cyt C的释放分别为(6 h: 85.49±2.17、19.56±2.09、35.36±3.21; 24 h: 82.59±2.18、14.76±1.03、44.57±5.56; 48 h: 28.45±2.39、88.79±4.32、78.63±7.65).
结论: 线粒体损伤在黄芩甙诱导肝癌细胞凋亡中起重要作用, 其机制可能为抑制肝癌细胞Bcl-2蛋白表达, 促进caspase-3活性增加, 使细胞内Ca2+增加, 激发线粒体膜通透性转运孔开放, 降低线粒体跨膜电位, 促进Cyt C的释放.
Keywords: 黄芩甙; 肝细胞癌; 凋亡; 线粒体膜电位; 细胞色素C; Ca2+