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世界华人消化杂志. 2008-12-18; 16(35): 3984-3987
Published online 2008-12-18. doi: 10.11569/wcjd.v16.i35.3984
Published online 2008-12-18. doi: 10.11569/wcjd.v16.i35.3984
胃癌相关基因GCRG123的克隆及其在大肠杆菌中的表达
伍银桥, 王刚石, 王孟薇, 吴本俨, 尤纬缔, 中国人民解放军总医院南楼消化科 北京市 100853
基金项目: 军队"十五"重点科研基金资助项目, No. 01Z035.
作者贡献分布: 此课题由王孟薇、吴本俨、王刚石及伍银桥共同设计; 研究过程由伍银桥、王刚石及尤纬缔操作完成; 本论文写作由伍银桥完成.
通讯作者: 伍银桥, 100853, 北京市复兴路28号, 中国人民解放军总医院南楼消化内科. wuyq56@hotmail.com
电话: 010-66876246
收稿日期: 2008-11-05
修回日期: 2008-11-19
接受日期: 2008-11-24
在线出版日期: 2008-12-18
修回日期: 2008-11-19
接受日期: 2008-11-24
在线出版日期: 2008-12-18
Abstract
目的: 利用硫氧还蛋白融合表达系统表达胃癌相关基因GCRG123.
方法: 采用PCR技术从pGEM-T质粒上扩增出含完整ORF的GCRG123 cDNA序列, 将其克隆至硫氧还蛋白融合表达载体pET102/D-TOPO中, 转化大肠杆菌BL21, 经IPTG诱导表达重组融合蛋白, SDS-PAGE分析表达产物.
结果: 工程菌经IPTG诱导后, 高效表达出相对分子质量约18 700的重组融合蛋白. 薄层凝胶扫描显示, 其表达量占菌体总蛋白质的23.6%.
结论: 在大肠杆菌中成功表达了GCRG123重组融合蛋白.
Keywords: 胃癌; 基因; GCRG123; 原核表达