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世界华人消化杂志. 2008-12-08; 16(34): 3835-3839
Published online 2008-12-08. doi: 10.11569/wcjd.v16.i34.3835
Published online 2008-12-08. doi: 10.11569/wcjd.v16.i34.3835
雷公藤内酯醇对5-LOX代谢通路和胰腺癌细胞凋亡的影响
丁晓凌, 周国雄, 南通大学附属医院消化内科 江苏省南通市 226001
周晓荣, 汪晓莺, 南通大学医学院免疫研究室 江苏省南通市 226001
丁晓凌, 2004级南通大学附属医院消化内科硕士, 主治医师, 讲师, 主要从事胰腺癌研究.
基金项目: 江苏省自然科学基金资助项目, No. BK2004049.
作者贡献分布: 此课题由周国雄与丁晓凌设计; 研究过程由丁晓凌操作完成; 研究所用新试剂及分析工具由周晓荣与汪晓莺提供; 数据分析由丁晓凌与周晓荣完成; 本论文写作由丁晓凌, 周国雄及周晓荣完成.
通讯作者: 周国雄, 226001, 江苏省南通市西寺路20号, 南通大学附属医院消化内科. guoxiong_zhou@163.com
电话: 0513-85112816
收稿日期: 2008-09-27
修回日期: 2008-10-21
接受日期: 2008-10-27
在线出版日期: 2008-12-08
修回日期: 2008-10-21
接受日期: 2008-10-27
在线出版日期: 2008-12-08
Abstract
目的: 探讨雷公藤内酯醇(triptolide, TL)通过抑制5-脂氧合酶(5-lipoxygenase, 5-LOX)代谢通路对胰腺癌细胞生长增殖及凋亡的影响.
方法: 台盼蓝染色检测TL对胰腺癌细胞PANC-1、ASPC-1和SW1990的杀伤作用;流式细胞术分析凋亡率; Real-time PCR和Western blot检测TL对5-LOX表达的影响; ELISA检测5-LOX下游产物LTB4的含量. 构建5-LOX表达质粒, 筛选稳定转染的SW1990细胞株(SW1990/5-LOX), Western blot检测野生型、转染空质粒、转染5-LOX基因的SW1990细胞5-LOX蛋白表达水平, 并检测胰腺癌细胞高表达5-LOX对TL诱导凋亡的影响.
结果: TL能诱导胰腺癌细胞凋亡, TL 50 μg/L作用24 h后活细胞比例为PANC-1 70.5%±6.8%, ASPC-1 61.2%±5.6%, SW1990 52.8%±5.3%, 比对照组显著减少(P<0.05); 凋亡细胞数12 h组与对照组相比, 有差异(24.2±3.23 vs 9.5±2.18, P<0.05). TL能显著抑制5-LOX表达及LTB4生成. 稳定转染后, 细胞内5-LOX蛋白表达量是Wt组的4倍左右, 培养上清中LTB4表达水平也显著高于Wt组(P<0.01). 过表达5-LOX使SW1990细胞增强了对TL诱导凋亡的抵抗作用, 细胞死亡和凋亡率均明显低于对照组(P<0.01或0.05).
结论: TL可以在体外诱导胰腺癌细胞增殖抑制和细胞凋亡, 该效应与TL抑制5-LOX代谢通路的活性可能有直接关系, 提示TL可能开发成临床治疗胰腺癌的有效药物.
Keywords: 胰腺癌; 雷公藤内酯醇; 5-脂氧合酶