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世界华人消化杂志. 2008-11-18; 16(32): 3610-3615
Published online 2008-11-18. doi: 10.11569/wcjd.v16.i32.3610
Published online 2008-11-18. doi: 10.11569/wcjd.v16.i32.3610
CagA对AGS细胞Ca2+相关蛋白磷酸化的影响
肖迪, 赵飞, 宋衍燕, 孟凡亮, 何利华, 张慧芳, 张建中, 中国疾病预防控制中心传染病预防控制所 北京市 102206
肖迪, 助理研究员, 主要从事传染病蛋白质组学研究.
作者贡献分布: 此课题由肖迪与张建中设计; 细菌和细胞培养由肖迪, 宋衍燕, 孟凡亮, 何利华及张慧芳完成; 细菌和细胞相互作用由肖迪与宋衍燕完成; 蛋白提取与磷酸化蛋白富集由肖迪完成; 二维凝胶电泳由肖迪与赵飞完成; 质谱分析由肖迪完成; 数据分析由肖迪完成; 本论文写作由肖迪完成.
通讯作者: 张建中, 102206, 北京市, 中国疾病预防控制中心传染病预防控制所. zhangjianzhong@icdc.cn
电话: 010-61739456 传真: 010-61730233
收稿日期: 2008-09-24
修回日期: 2008-10-13
接受日期: 2008-10-21
在线出版日期: 2008-11-18
修回日期: 2008-10-13
接受日期: 2008-10-21
在线出版日期: 2008-11-18
Abstract
目的: 分析幽门螺杆菌(H. pylori)细胞毒素相关蛋白A(CagA)对人胃腺癌黏膜上皮细胞(AGS)Ca2+相关蛋白磷酸化的影响, 进一步揭示H. pylori的致病机制.
方法: 采用金属离子亲和吸附富集技术富集H. pylori、H. pylori CagA缺失株(H. pylori △CagA)与AGS细胞相互作用4 h, 以及培养相同时间的AGS细胞的磷酸化蛋白, 利用二维凝胶电泳技术分离磷酸化蛋白, ImageMaster 2D分析软件识别差异蛋白, MALDI-TOF/TOF质谱鉴定确认蛋白.
结果: H. pylori △CagA作用的AGS细胞, 与培养相同时间的AGS细胞比较表达量不变, 而H. pylori △CagA作用的AGS细胞表达量发生了明显变化, 表明此蛋白的变化是单纯由CagA引起的; 此类蛋白点共鉴定出19个, 其中3个蛋白点与Ca2+相关. 钙离子结合蛋白(nucleobindin-2 precursor, CALNUC)在AGS细胞以及H. pylori △CagA与AGS相互作用的2-D胶中表达量接近, 而H. pylori与AGS相互作用后该蛋白表达量明显降低.
结论: H. pylori CagA进入AGS细胞可能会影响内质网、线粒体及高尔基体的钙稳态, 诱发内质网、线粒体、高尔基体凋亡或增殖途径, 而成为胃炎、胃溃疡、胃癌发生的诱因之一.
Keywords: 细胞毒素相关蛋白A; 磷酸化蛋白质; 钙离子通道; 致病机制