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血管内皮生长因子165基因对人胃癌细胞凋亡的影响及机制
欧希龙, 关云艳, 颜芳, 杨柳, 东南大学附属中大医院消化内科 江苏省南京市 210009
孙为豪, 陈国胜, 南京医科大学第一附属医院老年消化科 江苏省南京市 210029
作者贡献分布: 此课题由欧希龙, 关云艳, 孙为豪及陈宝安设计; 研究过程由欧希龙, 关云艳, 颜芳, 杨柳及陈国胜操作完成; 研究所用新试剂及分析工具由关云艳及颜芳提供; 数据分析由关云艳完成; 本论文写作由欧希龙, 关云艳及杨柳完成.
通讯作者: 欧希龙, 210009, 江苏省南京市丁家桥87号, 东南大学附属中大医院消化内科. ouxilong@126.com
收稿日期: 2007-09-25
修回日期: 2008-01-10
接受日期: 2008-01-15
在线出版日期: 2008-01-28
修回日期: 2008-01-10
接受日期: 2008-01-15
在线出版日期: 2008-01-28
Abstract
目的: 本实验探讨血管内皮生长因子165(VEGF165)对体外培养的胃癌细胞株BGC-823凋亡的影响和机制.
方法: 将BGC-823细胞分为对照组、感染复数(MOI = 20)病毒Ad-GFP的Ad-GFP组, 重组腺病毒Ad-VEGF165转染的Ad-VEGF165组, 应用流式细胞仪检测细胞凋亡的百分率, RT-PCR方法检测凋亡抑制基因Bcl-2 mRNA的表达, 免疫细胞化学方法检测Bcl-2蛋白的表达情况.
结果: 流式细胞仪测定显示Ad-VEGF165组的细胞凋亡率明显低于Ad-GFP组和对照组(4.6%±0.31% vs 8.37%±1.06%, 7.73%±0.86%, P<0.01); RT-PCR和细胞免疫化学结果显示VEGF165转染BGC-823细胞后促进了细胞Bcl-2 mRNA和蛋白的表达, Ad-VEGF165组Bcl-2 mRNA和蛋白均高于对照组和Ad-GFP组(Bcl-2 mRNA: 0.761±0.05 vs 0.363±0.12, 0.356±0.08; Bcl-2蛋白: 1.010±0.08 vs 0.865±0.07, 0.901±0.05; P<0.01).
结论: VEGF165通过上调凋亡抑制基因Bcl-2及其蛋白的表达, 来抑制血浆饥饿诱导的胃癌细胞的凋亡.
Keywords: 腺病毒; 血管内皮生长因子165; 胃癌; 凋亡; Bcl-2; 逆转录聚合酶链式反应