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应用蛋白指纹图谱技术筛选原发性胆汁性肝硬化患者血清特异性标志物
胡朝军, 李永哲, 赵冠飞, 佟大伟, 张蜀澜, 中国医学科学院, 中国协和医科大学, 北京协和医院 北京市 100730
李宁, 许洋, 吴阶平医学基金会 北京市 100062
胡朝军, 研究实习员, 主要从事自身免疫性疾病实验室诊断研究及蛋白指纹图谱技术临床应用研究.
基金项目: 国家自然科学基金资助项目, No. 30640084, No. 30471617.
作者贡献分布: 胡朝军与李永哲对此文所作贡献均等; 此课题由胡朝军, 李永哲, 李宁及许洋设计; 研究过程由赵冠飞, 佟大伟及张蜀澜操作完成; 研究所用新试剂及分析工具由许洋提供; 数据分析由胡朝军, 李永哲及李宁完成; 本论文写作由胡朝军, 李永哲及李宁完成.
通讯作者: 李永哲, 100730, 中国医学科学院, 中国协和医科大学, 北京协和医院. yongzhelipumch@yahoo.com.cnn
电话: 010-65295416 传真: 010-65295416
收稿日期: 2007-10-09
修回日期: 2007-12-23
接受日期: 2008-01-15
在线出版日期: 2008-01-28
修回日期: 2007-12-23
接受日期: 2008-01-15
在线出版日期: 2008-01-28
Abstract
目的: 探讨蛋白指纹图谱技术筛选原发性胆汁性肝硬化(PBC)患者血清中可用于诊断的特异性标志物.
方法: 采用弱阳离子纳米磁性微球捕获血清中的蛋白, ProteinChip PBSII-C型蛋白质芯片阅读仪检测绘制成蛋白指纹图谱. 所有蛋白指纹图谱采用Biomarker Wizard 3.1分析之后用Biomarker Patterns Software 5.0识别最终可能用于PBC诊断的蛋白标志物并优化组合建立诊断模型.
结果: 在PBC患者和对照组之间找到69个差异蛋白峰(P<0.05). 其中质荷比(m/z)为3445, 4260, 8133和16290的蛋白峰建立PBC诊断模型. 该诊断模型能很好地把PBC患者从其他肝脏疾病患者和正常人群中区分出来, 其敏感性为93.3%, 特异性为95.1%. 经双盲实验验证, 该模型对PBC诊断的敏感性为92.9%, 特异性为82.4%.
结论: 采用纳米磁性微球与蛋白质芯片阅读仪联用的蛋白指纹图谱技术可以检测PBC患者血清中的特异性蛋白标志物, 并建立敏感性和特异性均较高的PBC诊断模型.
Keywords: 原发性胆汁性肝硬化; 自身免疫性肝炎; 生物标志物; 磁性微球; 蛋白指纹图谱技术