基础研究
Copyright ©The Author(s) 2008. Published by Baishideng Publishing Group Inc. All rights reserved.
世界华人消化杂志. 2008-09-18; 16(26): 2929-2934
Published online 2008-09-18. doi: 10.11569/wcjd.v16.i26.2929
全反式维甲酸对Walker-256肝癌细胞分化及凋亡的诱导作用
方建林, 郑传胜, 冯敢生, 陶红芳, 王勇, 任建庄
方建林, 郑传胜, 冯敢生, 王勇, 任建庄, 华中科技大学同济医学院附属协和医院放射科 湖北省武汉市 430022
陶红芳, 武汉大学人民医院儿科 湖北省武汉市 430060
方建林, 主治医师, 博士, 主要从事肝癌的介入治疗研究.
基金项目: 湖北省自然科学基金资助项目, No. 2007ABA284.
作者贡献分布: 方建林与郑传胜对此文所作贡献均等; 此课题由方建林, 郑传胜, 冯敢生及陶红芳设计; 研究过程由方建林, 陶红芳及王勇操作完成; 数据分析由方建林与陶红芳完成; 本论文写作由方建林, 郑传胜及任建庄完成.
通讯作者: 郑传胜, 430022, 湖北省武汉市, 华中科技大学同济医学院附属协和医院放射科. hqzcsxh@sina.com
电话: 027-85726432
收稿日期: 2008-06-08
修回日期: 2008-08-15
接受日期: 2008-08-26
在线出版日期: 2008-09-18
Abstract

目的: 观察ATRA对Walker-256肝癌细胞的分化诱导及促进凋亡作用, 探讨其作用机制.

方法: 在肝癌细胞Walker-256细胞株中加入不同浓度的ATRA(100、10、5、1 μmol/L), 培养2 d, 荧光倒置显微镜观察细胞形态学变化; MTT比色法检测Walker-256细胞的增殖抑制; 流式细胞术分析不同DNA含量的细胞分布, 计算细胞凋亡百分率; RT-PCR检测凋亡相关基因Fas、bcl-2 mRNA的表达; Western blot检测Caspase 3、8蛋白的表达.

结果: 随着ATRA浓度的递增, Walker-256细胞表现出细胞分化及凋亡的形态学上的改变. ATRA可明显抑制细胞增殖, 5和10 μmol/L ATRA对细胞增殖抑制最为明显, 24、48、72 h的增殖抑制率分别为21.86%、57.39%、68.17%和27.23%、80.09%、92.15%, 呈浓度及时间依赖性. 5和10 μmol/L ATRA对细胞的凋亡诱导率与对照组相比, 差异有统计学意义(t = 9.61, 11.38, P<0.05, 0.01). ATRA作用Walker-256细胞后上调Fas表达, 下调bcl-2的表达, 10 μmol/L ATRA对Fas及bcl-2的调节与对照组相比，差异有统计学意义(t = 12.33, 10.78, 均P<0.05). 与对照组相比, 10 μmol/L ATRA作用48 h后对Caspase 3及Caspase 8酶原剪切活化明显(t = 9.76, 10.21, 均P<0.05).

结论: ATRA对Walker-256肝癌细胞具有分化诱导及促进其凋亡的作用.

Keywords: 全反式维甲酸; Walker-256肝癌细胞; 分化诱导; 凋亡