Published online 2008-09-18. doi: 10.11569/wcjd.v16.i26.2916
修回日期: 2008-09-05
接受日期: 2008-09-08
在线出版日期: 2008-09-18
目的: 研究幽门螺杆菌(Helicobacter pylori, H pylori)刺激人胃癌细胞SGC-7901后, 对细胞内SHP-2表达及细胞骨架的影响.
方法: 将临床分离的胃癌H pylori菌体裂解, 以超声提取物刺激SGC-7901细胞1 h, 逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)半定量法测定刺激前后SHP-2表达量的变化; 并将PCR产物进行克隆和测序. 将不同疾病(胃炎, 胃溃疡, 胃癌)的菌株H pylori超声提取物刺激SGC-7901细胞10 min, 采用phalloidin对细胞内骨架进行荧光染色, 研究其对细胞骨架的影响. 将野生型和突变型RhoA质粒转入细胞后, 再以胃癌H pylori超声提取物刺激, 进一步观察细胞内骨架的变化.
结果: 胃癌H pylori菌体超声提取物刺激SGC-7901细胞1 h后, 细胞内SHP-2表达量没有明显变化. 胃炎, 胃溃疡, 胃癌H pylori菌体超声提取物刺激人胃癌细胞SGC-7901后, 与对照组相比, 细胞内骨架增多(65.4±0.510, 63.37±0.475, 64.53±0.522 vs 20.34±1.376, 均P<0.05), 但这三种菌株间相比无统计学意义. 转染入野生型RhoA质粒的细胞经胃癌H pylori菌体超声提取物刺激后, 细胞内骨架较未转染者增多(72.99±1.818 vs 61.78±1.288, P<0.05), 而转染入无活性突变型RhoA质粒的细胞经刺激后, 细胞内骨架与未转染者无明显差别.
结论: 胃癌H pylori超声提取物未能引起细胞内SHP-2 mRNA表达量的改变; 胃炎, 胃溃疡, 胃癌H pylori菌体超声提取物能够增加细胞内骨架的形成, 其作用与H pylori菌种无关, RhoA活性的增强是其中的一个重要中间环节.