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世界华人消化杂志. 2008-09-08; 16(25): 2820-2825
Published online 2008-09-08. doi: 10.11569/wcjd.v16.i25.2820
Published online 2008-09-08. doi: 10.11569/wcjd.v16.i25.2820
IFNγ基因修饰的树突状细胞在肝癌免疫治疗中的应用
薛刚, 曹永宽, 王培红, 张国虎, 龚加庆, 田伏洲, 中国人民解放军成都军区总医院全军普通外科中心 四川省成都市 610083
程莹, 中国人民解放军成都军区总医院内分泌科 四川省成都市 610083
黄文林, 中山大学肿瘤防治中心 肿瘤学国家重点实验室 广东省广州市 510060
薛刚, 博士, 主要从事普通外科基础与临床研究.
基金项目: 国家基础研究计划(973)资助项目, No. 2004CB518801; 广东省科委重大攻关资助项目, No. 2003A10902.
作者贡献分布: 此课题设计由薛刚完成; 研究过程由薛刚、曹永宽、王培红、张国虎及龚加庆操作完成; 数据分析由薛刚与程莹完成; 本论文写作由薛刚与程莹完成; 田伏洲指导.
通讯作者: 黄文林, 510060, 广东省广州市, 中山大学肿瘤防治中心、肿瘤学国家重点实验室. wl-huang@hotmail.com
收稿日期: 2008-07-03
修回日期: 2008-08-03
接受日期: 2008-08-04
在线出版日期: 2008-09-08
修回日期: 2008-08-03
接受日期: 2008-08-04
在线出版日期: 2008-09-08
Abstract
目的: 研究IFNγ修饰的树突状细胞(dendritic cell, DC)对T淋巴细胞增殖和分化的影响以及后者对肝癌HepG2细胞的杀伤作用.
方法: 构建携带人IFNγ基因的重组复制缺陷型腺病毒载体(Ad-IFNγ), 用其感染人外周血单个核细胞来源的DC, 观察后者表型和吞噬功能的变化. 再用反复冻融裂解法提取的肝癌HepG2细胞抗原致敏DC, 将其与自身T淋巴细胞共同培养, 观察T淋巴细胞的增殖和分化情况以及活化T细胞对HepG2细胞的杀伤作用.
结果: Ad-IFNγ转染后24 h, 各组DC的吞噬能力差异无统计学意义(F = 2.31, P = 0.13). Ad-IFNγ转染的DC培养上清中有IFNγ的高表达, 其表达量显著高于另外两组(P<0.01). Ad-IFNγ-DC促进T细胞增殖的能力明显强于Ad-LacZ-DC和NTDC(P<0.01). 以HepG2细胞抗原致敏时, Ad-IFNγ-DC活化的T淋巴细胞对HepG2细胞的杀伤率在E:T = 20:1和E:T = 50:1时分别为43.64%±3.51%和48.87%±4.83%, 显著高于Ad-LacZ-DC和NTDC组(P<0.01).
结论: IFNγ的修饰能促进DC成熟, 增强DC促进T淋巴细胞增殖的作用, 诱导细胞免疫, 增强T细胞的细胞毒作用, 使T细胞能有效地杀伤肿瘤细胞.
Keywords: γ干扰素; 树突状细胞; 肝癌; 细胞毒性