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世界华人消化杂志. 2008-09-08; 16(25): 2809-2814
Published online 2008-09-08. doi: 10.11569/wcjd.v16.i25.2809
Published online 2008-09-08. doi: 10.11569/wcjd.v16.i25.2809
瘦素对脂变人肝细胞TG的含量及PPARα、CPT-I表达的影响
谭英征, 傅京力, 株洲市一医院感染内科 湖南省株洲市 412000
陈双华, 湖南中医药高等专科学校 湖南省株洲市 412012
阳学风, 胡杨, 南华大学附属南华医院消化内科 湖南衡阳市 421002
胡剑峰, 浏阳市人民医院消化内科 湖南省浏阳市 410300
谭英征, 2004年南华大学硕士, 主要从事防治慢性肝病的研究.
作者贡献分布: 此课题由谭英征、陈双华、阳学风及胡剑峰设计; 研究过程由谭英征、陈双华、胡剑峰、傅京力及胡杨操作完成; 数据分析由谭英征、阳学风及胡剑峰完成; 本论文写作由谭英征及陈双华完成.
通讯作者: 谭英征, 412000, 湖南省株洲市, 株洲市一医院感染内科. tyz20040343@yahoo.com.cn
电话: 0733-8203284
收稿日期: 2008-07-02
修回日期: 2008-08-06
接受日期: 2008-08-09
在线出版日期: 2008-09-08
修回日期: 2008-08-06
接受日期: 2008-08-09
在线出版日期: 2008-09-08
Abstract
目的: 探讨瘦素对肝细胞脂质变性的作用及其机制.
方法: 以离体人肝L-02细胞株制备肝细胞脂肪变性模型. 实验分为正常肝细胞组、人肝L-02细胞脂肪变性模型组、瘦素不同浓度处理Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ组(浓度分别为10-8、10-7、10-6 mol/L)和阳性对照组. 孵育24 h后, 油红O染色观察细胞形态和细胞内脂滴的形成, 高效液相色谱法(HPLC)检测细胞内甘油三酯(TG)的含量, RT-PCR检测过氧化物酶体增殖物激活受体α(PPARα)及其目标基因肉碱转移酶-I(CPT-I) mRNA水平的表达.
结果: 模型组和瘦素Ⅰ组细胞质中有较多的脂滴形成, 而瘦素Ⅱ、Ⅲ组、正常组、阳性对照组胞质中脂滴较少. 瘦素浓度为10-8、10-7、10-6 mol/L时, 肝细胞中TG的含量为1.063±0.146、0.648±0.023、0.553±0.045 mmoL/g蛋白, 呈细胞依赖性减少. 瘦素Ⅱ、Ⅲ组与阳性对照组比较, PPARα的mRNA表达上升更为明显, 差别有统计学意义(P<0.01); 但瘦素Ⅰ组与阳性对照组之间无显著性差异. 模型组与正常组比较, CPT-I mRNA表达无明显改变, 经瘦素处理后, 较模型组相比, CPT-I mRNA表达明显上升(P<0.01).
结论: 瘦素能降低人肝L-02脂变细胞内TG的含量, 呈剂量依赖关系, 其降低细胞内TG作用可能与PPARα及其目标基因表达上调有关.
Keywords: 瘦素; 人肝L-02细胞; 过氧化物酶体增殖物激活受体α; 肉碱转移酶-I; 高效液相色谱法; 逆转录-聚合酶链反应