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世界华人消化杂志. 2008-08-08; 16(22): 2448-2452
Published online 2008-08-08. doi: 10.11569/wcjd.v16.i22.2448
Published online 2008-08-08. doi: 10.11569/wcjd.v16.i22.2448
聚合酶RNA干扰对小鼠体内乙型肝炎病毒的抑制作用
高海燕, 张建军, 杨向东, 卞铁荣, 阳艾玲, 夏纪毅, 耿颖, 黄飞, 四川泸州医学院附属医院中心实验室、感染病科 四川省泸州市 646000
高海燕, 江苏省南京市江宁医院 江苏省南京市 211111
王道理, 河南南阳医学专科学校附属医院 河南省南阳市 473001
高海燕, 泸州医学院2003级硕士, 主要从事感染性疾病基础与临床研究.
基金项目: 四川省科技厅资助项目, No. 05JY029-145.
作者贡献分布: 此课题设计由张建军完成; 研究过程由高海燕, 杨向东, 王道理, 卞铁荣, 阳艾玲, 夏纪毅, 耿颖及黄飞完成; 数据分析高海燕; 写作由高海燕与张建军完成.
通讯作者: 张建军, 646000, 四川省泸州市, 四川省泸州医学院感染病科. zhangjianjun2535@163.com
收稿日期: 2007-06-22
修回日期: 2008-05-01
接受日期: 2008-05-08
在线出版日期: 2008-08-08
修回日期: 2008-05-01
接受日期: 2008-05-08
在线出版日期: 2008-08-08
Abstract
目的: 利用流体动力学法构建小鼠HBV感染模型, 观察pSiHBV/P在体内对HBV的抑制作用.
方法: 以流体动力学法构建小鼠HBV感染模型, 将pSiHBV/P与pHBV1.3尾静脉共注射Balb/c小鼠. 转染后第6天, 用酶联免疫分析法检测小鼠血清乙肝表面抗原(HBsAg), 用荧光定量PCR检测血清HBV DNA的水平, 用免疫组织化学方法检测肝内HBsAg、乙肝病毒核心抗原(HBcAg)的表达, RT-PCR法半定量检测肝内HBV 3.5 kb mRNA、S-mRNA及0.7 kb mRNA的水平.
结果: 感染组和无关干扰组血清HBsAg表达量平均值分别为9.11±3.34和8.19±5.41, pSiHBV/P干扰组平均值1.94±1.78; pSiHBV/P干扰组血清中HBV DNA的含量较感染组明显下降(2.91±0.55 vs 4.32±0.57, P<0.05), 抑制率为33%; 干扰组肝细胞中HBsAg和HBcAg阳性细胞数较对照组明显减少; 干扰组3.5 kb mRNA、S-mRNA的水平较感染组和无关干扰组均有明显下降(0.48±0.19 vs 1.06±0.40, 0.88±0.54; 0.46±0.18 vs 1.05±0.38, 0.90±0.51, P<0.05).
结论: RNAi技术在体内能高效、特异地抑制小鼠体内HBV.
Keywords: 肝炎病毒; 模型; 动物; 基因治疗; RNA干扰