基础研究
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世界华人消化杂志. 2008-08-08; 16(22): 2448-2452
Published online 2008-08-08. doi: 10.11569/wcjd.v16.i22.2448
聚合酶RNA干扰对小鼠体内乙型肝炎病毒的抑制作用
高海燕, 张建军, 杨向东, 王道理, 卞铁荣, 阳艾玲, 夏纪毅, 耿颖, 黄飞
高海燕, 张建军, 杨向东, 卞铁荣, 阳艾玲, 夏纪毅, 耿颖, 黄飞, 四川泸州医学院附属医院中心实验室、感染病科 四川省泸州市 646000
高海燕, 江苏省南京市江宁医院 江苏省南京市 211111
王道理, 河南南阳医学专科学校附属医院 河南省南阳市 473001
高海燕, 泸州医学院2003级硕士, 主要从事感染性疾病基础与临床研究.
基金项目: 四川省科技厅资助项目, No. 05JY029-145.
作者贡献分布: 此课题设计由张建军完成; 研究过程由高海燕, 杨向东, 王道理, 卞铁荣, 阳艾玲, 夏纪毅, 耿颖及黄飞完成; 数据分析高海燕; 写作由高海燕与张建军完成.
通讯作者: 张建军, 646000, 四川省泸州市, 四川省泸州医学院感染病科. zhangjianjun2535@163.com
收稿日期: 2007-06-22
修回日期: 2008-05-01
接受日期: 2008-05-08
在线出版日期: 2008-08-08
Abstract

目的: 利用流体动力学法构建小鼠HBV感染模型, 观察pSiHBV/P在体内对HBV的抑制作用.

方法: 以流体动力学法构建小鼠HBV感染模型, 将pSiHBV/P与pHBV1.3尾静脉共注射Balb/c小鼠. 转染后第6天, 用酶联免疫分析法检测小鼠血清乙肝表面抗原(HBsAg), 用荧光定量PCR检测血清HBV DNA的水平, 用免疫组织化学方法检测肝内HBsAg、乙肝病毒核心抗原(HBcAg)的表达, RT-PCR法半定量检测肝内HBV 3.5 kb mRNA、S-mRNA及0.7 kb mRNA的水平.

结果: 感染组和无关干扰组血清HBsAg表达量平均值分别为9.11±3.34和8.19±5.41, pSiHBV/P干扰组平均值1.94±1.78; pSiHBV/P干扰组血清中HBV DNA的含量较感染组明显下降(2.91±0.55 vs 4.32±0.57, P<0.05), 抑制率为33%; 干扰组肝细胞中HBsAg和HBcAg阳性细胞数较对照组明显减少; 干扰组3.5 kb mRNA、S-mRNA的水平较感染组和无关干扰组均有明显下降(0.48±0.19 vs 1.06±0.40, 0.88±0.54; 0.46±0.18 vs 1.05±0.38, 0.90±0.51, P<0.05).

结论: RNAi技术在体内能高效、特异地抑制小鼠体内HBV.

Keywords: 肝炎病毒; 模型; 动物; 基因治疗; RNA干扰