基础研究
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世界华人消化杂志. 2008-07-08; 16(19): 2107-2111
Published online 2008-07-08. doi: 10.11569/wcjd.v16.i19.2107
靶向5-LOX的siRNA诱导胰腺癌细胞的凋亡
张海峰, 周国雄, 丁晓凌, 沈勤, 杨江勇
张海峰, 周国雄, 丁晓凌, 南通大学附属医院消化内科 江苏省南通市 226001
沈勤, 杨江勇, 南通大学医学院生化研究室 江苏省南通市 226001
张海峰, 2005级南通大学附属医院消化内科硕士, 主治医师, 主要从事胰腺癌研究.
基金项目: 江苏省自然科学基金资助项, No. BK2004049; 江苏省重点医学人才项目资助, No. RC2007085.
作者贡献分布: 此课题由张海峰, 周国雄及丁晓凌设计; 研究过程由张海峰与杨江勇操作完成; 研究所用新试剂及分析工具由沈琴与杨江勇提供; 数据分析由张海峰, 周国雄与丁晓凌完成; 本论文写作由张海峰, 周国雄与丁晓凌完成.
通讯作者: 周国雄, 226001, 江苏省南通市西寺路20号, 南通大学附属医院消化内科. zhouguoxiong@medmail.com.cn
电话: 0513-85119222
收稿日期: 2008-03-17
修回日期: 2008-05-01
接受日期: 2008-05-12
在线出版日期: 2008-07-08
Abstract

目的: 采用RNA干扰技术(siRNA)阻断5-LOX基因的表达, 观察其抑制人胰腺癌细胞增殖及诱导细胞凋亡的作用.

方法: 构建靶向5-LOX的siRNA质粒表达载体, 采用Lipofectamine-2000转染人胰腺癌细胞株SW1990, 采用RT-PCR检测RNA干扰后5-LOX mRNA表达, MTT法检测细胞的增殖抑制率, 流式细胞仪检测细胞凋亡率.

结果: 靶向5-LOX序列特异性的三条siRNA(组1、组2、组3)可以有效地抑制SW1990细胞5-LOX基因表达, 其表达抑制率分别为19.6%±1.9%、55.4%±2.6%和55.2%±2.7%. 转染靶向5-LOX siRNA的三个质粒表达载体可以显著抑制SW1990细胞的增殖, 细胞接种24 h后, 三组增殖抑制率分别为5.37%±1.19%、11.63%±1.25%和13.67%±1.04%; 48 h后其增殖抑制率分别为16.13%±1.5%、26.63%±1.22%和25.47%±1.67%, 各siRNA组增殖抑制率高于空白组和阴性对照组(均P<0.05), 转染后24 h和48 h三组细胞凋亡率分别为5.56%±1.05%、11.45%±1.44%、12.13%±1.36%和7.37%±1.23%、18.75%±1.5%和22.02%±1.45%, 均高于空白对照组和阴性对照组(P<0.05).

结论: 所构建的靶向5-LOX的siRNA质粒表达载体可以有效阻断SW1990细胞5-LOX基因表达, 显著地抑制SW1990细胞增殖, 并在一定程度上诱导其凋亡.

Keywords: RNA干扰; 5-脂氧合酶; 胰腺癌; 细胞凋亡