Published online 2008-04-28. doi: 10.11569/wcjd.v16.i12.1344
修回日期: 2008-03-12
接受日期: 2008-04-21
在线出版日期: 2008-04-28
目的: 研究HBsAg负载的慢性乙肝患者外周血树突状细胞(dendritic cells, DCs)对自身Th1细胞分化的诱导作用.
方法: Ficoll密度梯度离心和贴壁法分离慢性乙肝患者外周血单核细胞, 以含rhIL-4+rhGM-CSF的完全培养基诱导DCs. 流式细胞术检测各组DC表面CD80, CD86, CD40和HLA-DR分子的表达, CCK-8法检测各组DCs刺激同种异体淋巴细胞增殖的能力, ELISA法检测各组DCs培养液上清中IL-12的水平. 免疫磁珠分选慢性乙肝患者外周血CD4+ T细胞, 分别与患者自身的DCs共培养, 细胞内细胞因子染色, 流式细胞仪检测共培养后CD4+ T细胞内特征性细胞因子IFN-γ和IL-4, ELISA法检测共培养上清中IFN-γ/IL-4的水平.
结果: 与对照组相比, HBsAg、IFN-γ和HBsAg+IFN-γ组DCs表面表达CD80, CD86, CD40和HLA-DR分子水平较高; 刺激同种异体淋巴细胞增殖的能力较强; DCs分泌的上清液中, IL-12水平也较高. 与对照组相比, HBsAg、IFN-γ和HBsAg+IFN-γ组DCs与自身Th细胞共培养后, Th1细胞占CD4+ T细胞的百分比升高(10.76%±3.98%, 11.43%±4.32%, 15.28%±4.73% vs 7.84%±3.10%, P<0.01), Th2细胞占CD4+ T细胞的百分比降低(1.43%±0.96%, 1.68%±0.16%, 0.92%±0.21% vs 2.61%±1.27%, P<0.01), 共培养上清中IFN-γ的水平增高(578±47 mg/L, 496±92 mg/L, 784±97 mg/L vs 342±34 mg/L, P<0.05), IL-4的水平降低(187±52 mg/L, 169±38 mg/L, 89±37 mg/L vs 226±48 mg/L, P<0.05), 以HBsAg+IFN-γ组最为明显.
结论: 经HBsAg负载的DCs可以改善患者体内因DCs功能低下而引起的Th1细胞分化不足的状态.