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志贺菌基因转移耐多药相关蛋白初步分析
宋春花, 郗园林, 张梅喜, 段广才, 郑州大学公共卫生学院流行病学教研室 河南省郑州市 450001
黄志刚, 河北工程大学医学院 河北省邯郸市 056002
宋春花, 在读博士, 主要从事分子流行病学研究.
通讯作者: 段广才, 450001, 河南省郑州市科技大道100号, 郑州大学公共卫生学院流行病学教研室. gcduan@public.zz.ha.cn
电话: 0371-66969270
收稿日期: 2006-11-07
修回日期: 2007-01-13
接受日期: 2007-01-20
在线出版日期: 2007-03-18
修回日期: 2007-01-13
接受日期: 2007-01-20
在线出版日期: 2007-03-18
Abstract
目的: 探对志贺菌敏感株与基因转移耐多药株全菌蛋白进行蛋白质组学比较, 寻找细菌耐多药相关蛋白.
方法: 采用接合基因转移实验对临床分离鉴定志贺菌敏感株进行基因转移耐多药试验, 并对志贺菌敏感株及基因转移耐多药株全菌蛋白进行双向电泳; 电泳图谱采用Image Master 2D Platinum软件分析, 并对差异表达蛋白进行MOLDI TOF-TOF质谱分析.
结果: 成功获得志贺菌基因转移耐多药株, 在志贺菌敏感株与耐多药株全菌蛋白质图谱中分别检测出946±37个和1013±157个蛋白质斑点; 经分析共发现43个差异表达的蛋白点, 初步对其中5个表达量增加的差异蛋白进行质谱鉴定, 基因转移耐多药株中发现两个新出现的耐多药相关蛋白分别为CRISPR相关蛋白及Hsp60的分子伴侣蛋白(Groel-Groes-Adp7); ABC转运蛋白、胱氨酸合成酶、预测的胞浆脂蛋白表达量上调.
结论: 通过对鉴定的5个耐多药相关蛋白分析初步发现供体菌中一些耐多药相关基因通过基因转移方式插入志贺菌敏感株中并大量表达, 同时一些在细胞代谢中起重要作用的酶类表达量上调, ABC转运蛋白在志贺菌基因转移耐多药机制中也起重要作用.
Keywords: 志贺菌; 耐多药; 蛋白质组学; 双向电泳; 质谱分析; 差异表达