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重组腺病毒载体介导HOSM基因对肝癌细胞体外增殖的抑制作用
胡朝全, 孙诚谊, 贵阳医学院附属医院肝胆外科 贵州省贵阳市 550004
孙连生, 王玉芝, 军事医学科学院放射医学研究所 北京市 100850
基金项目: 贵州省科学技术基金资助项目, No. 20023106.
通讯作者: 孙诚谊, 550004, 贵州省贵阳市北京路9号, 贵阳医学院附属医院肝胆外科. scy@public.gz.cn
电话: 0851-86855119-6087传真: 0851-6820346
收稿日期: 2006-11-19
修回日期: 2006-11-30
接受日期: 2006-12-27
在线出版日期: 2007-03-08
修回日期: 2006-11-30
接受日期: 2006-12-27
在线出版日期: 2007-03-08
Abstract
目的: 构建含人抑瘤素M (human oncostatin M, HOSM)基因的复制缺陷型重组腺病毒载体AD-HOSM, 观察其对人肝癌细胞株HepG2在体外生长抑制情况.
方法: 通过同源重组方法构建含HOSM基因的缺陷型重组腺病毒载体AD-HOSM, 用报告基因AD-GFP检测腺病毒的对人肝癌细胞系的转染效率; 人肝癌细胞株HepG2转染含HOSM基因的缺陷型腺病毒载体AD-HOSM后, 用RT-PCR法检测外源HOSM基因在其中的表达; 台盼蓝染色、细胞计数法检测AD-HOSM对HepG2的体外增殖抑制情况.
结果: 成功构建了重组腺病毒载体AD-HOSM, AD-HOSM对肝癌细胞HepG2有较高的转染效率, 并且转染效率与病毒的剂量呈正相关. AD-HOSM感染HepG2细胞48 h, HOSM基因在转染细胞能有效的表达. 体外试验示, AD-HOSM转染的细胞的增殖却受到明显的抑制.
结论: 重组腺病毒介导HOSM表达能有效抑制HepG2在体外的增殖, 提示重组腺病毒介导的HOSM基因治疗可能成为肝癌治疗的候选方案.
Keywords: 腺病毒载体; 抑瘤素M; 基因转染; 逆转录聚合酶链反应; 肝癌