Copyright
©The Author(s) 2007. Published by Baishideng Publishing Group Inc. All rights reserved.
IL-1β致乙酸性胃溃疡复发大鼠的比较蛋白质组学分析
申定珠, 李家邦, 凌江红, 叶仁群, 黄国栋, 蒋荣鑫, 中南大学湘雅医院中西医结合研究所 湖南省长沙市 410008
叶川, 中南大学湘雅医院骨科 湖南省长沙市 410008
马国添, 中南大学湘雅医院心内科 湖南省长沙市 410008
申定珠, 中南大学湘雅医院中西医结合研究所2004级在读博士研究生, 主治医师, 主要从事内科消化系统疾病的中西医结合临床与实验研究.
基金项目: 湖南省自然科学基金资助项目, No. 04JJ3099.
通讯作者: 蒋荣鑫, 410008, 湖南省长沙市湘雅路87号, 中南大学湘雅医院中西医结合研究所. shensan13@163.com
电话: 0731-4327031
收稿日期: 2006-10-31
修回日期: 2006-12-01
接受日期: 2006-12-01
在线出版日期: 2007-02-08
修回日期: 2006-12-01
接受日期: 2006-12-01
在线出版日期: 2007-02-08
Abstract
目的: 筛选胃溃疡复发相关的蛋白质, 进一步揭示胃溃疡复发的分子机制.
方法: 以乙酸制备胃溃疡模型, 并用IL-1β诱导复发. 采用二维凝胶电泳(2-DE)技术分离胃溃疡复发大鼠胃溃疡处组织及正常大鼠相应处胃组织的总蛋白质, 图像分析识别差异表达的蛋白质点, 基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(MALDI-TOF-MS)得到相应的肽质量指纹图(PMF), 搜索数据库鉴定蛋白质.
结果: 获得分辨率较高、重复性较好的胃溃疡复发大鼠和正常大鼠胃组织的2-DE图谱, 质谱分析共鉴定了12个差异蛋白质点, 其中7个表达上调, 含热休克蛋白27(HSP27)、葡萄糖调节蛋白(GRP78)、L-乳酸脱氢酶轻链、磷酸甘油醛脱氢酶、血红蛋白β链、过氧化物酶2、过氧化物酶1; 5个表达下调, 含膜联蛋白A2、热休克蛋白60、氯离子通道蛋白1、黏着斑蛋白、凝溶胶蛋白. 随即采用免疫组化法检测差异蛋白质HSP27和GRP78在两类组织中的表达, 结果显示胃溃疡复发组HSP27和GRP78阳性细胞百分率均显著高于正常对照组(HSP27: 27.90%±5.34% vs 22.10%±3.67%, P<0.05; GRP78: 43.00%±4.52% vs 26.30%±3.95%, P<0.01).
结论: 差异蛋白如HSP27和GRP78等可能以不同的方式参与了胃溃疡的复发过程, 为揭示胃溃疡复发的机制提供了线索.
Keywords: 比较蛋白质组学; 胃溃疡复发; 二维凝胶电泳; 质谱; 免疫组化