基础研究
Copyright ©The Author(s) 2007. Published by Baishideng Publishing Group Inc. All rights reserved.
世界华人消化杂志. 2007-12-28; 15(36): 3793-3797
Published online 2007-12-28. doi: 10.11569/wcjd.v15.i36.3793
脂联素随原代HSC活化表达的动态变化及其对原代HSC表达MMP-13的影响
于丹, 马红
于丹, 马红, 首都医科大学附属北京友谊医院肝病中心 北京市 100050
于丹, 首都医科大学研究生, 从事肝纤维化发生机制的研究.
通讯作者: 马红, 100050, 北京市, 首都医科大学附属北京友谊医院肝病中心. mahongmd@yahoo.com.cn
电话: 010-63138727
收稿日期: 2007-07-24
修回日期: 2007-11-28
接受日期: 2007-12-22
在线出版日期: 2007-12-28
Abstract

目的: 探讨脂联素mRNA在原代肝星状细胞(hepatic stellate cell, HSC)活化过程中表达的变化趋势, 以及其对体外培养的原代HSC增殖状况和金属基质蛋白酶-13(MMP-13) mRNA与蛋白表达的影响.

方法:  改良的肝脏二步原位灌注法分离培养原代HSC; 以α-SMA为原代HSC活化的标志, Real-time PCR方法检测随HSC活化脂联素表达的动态变化; MTT方法检测脂联素对活化HSC增殖的影响, 以外源性脂联素处理原代HSC, 根据脂联素浓度, 分为对照组, 脂联素处理浓度62.5 mg/L, 125 mg/L, 250 mg/L, 500 mg/L五组, Real-time PCR方法检测MMP-13 mRNA表达; ELISA方法检测原代HSC分泌的MMP-13蛋白量. 

结果: HSC存活率的下降与脂联素浓度呈线性相关(OR = 0.828). MMP-13 mRNA和蛋白表达水平与外源性加入脂联素浓度正相关, 当脂联素浓度增加至500 g/L时, MMP-13 mRNA表达增高至对照组的5.54倍, MMP-13含量增加至30.951 mg/L显著高于对照组的24.127 mg/L, 差异具有显著统计学意义.

结论:  脂联素具有抑制肝纤维化的作用, 其机制可能与抑制HSC增殖和增强MMP-13在HSC细胞的表达有关.

Keywords: 肝星状细胞; 基质金属蛋白酶-13; 肝纤维化; 实时荧光聚合酶链反应; 酶联免疫吸附反应