基础研究
Copyright ©The Author(s) 2007. Published by Baishideng Publishing Group Inc. All rights reserved.
世界华人消化杂志. 2007-11-18; 15(32): 3385-3389
Published online 2007-11-18. doi: 10.11569/wcjd.v15.i32.3385
靶向cyclinE小干扰RNA对肝癌HepG2细胞增殖和凋亡的影响
田雪飞, 黄燕, 朱才, 肖竺, 郭永良
田雪飞, 肖竺, 郭永良, 湖南中医药大学中西医结合学院 湖南省长沙市 410208
黄燕, 朱才, 中南大学湘雅医院感染科 湖南省长沙市 410008
田雪飞, 2001年湖南中医药大学中医内科学博士研究生毕业, 2004年中南大学湘雅医院内科学博士后流动站出站, 副教授, 从事肝癌的中医药防治研究.
基金项目: 湖南省自然科学基金资助项目, No. 06JJ4054; 湖南省教育厅青年资助项目, No. 05B036.
通讯作者: 田雪飞, 410208, 湖南省长沙市含浦科教园区象嘴路, 湖南中医药大学中西医结合学院. windsame@163.com
电话: 0731-8458070 传真: 0731-8458071
收稿日期: 2007-07-20
修回日期: 2007-10-29
接受日期: 2007-10-28
在线出版日期: 2007-11-18
Abstract

目的: 以cyclinE基因编码区为靶位, 构建表达小干扰RNA(siRNA)的质粒载体, 观察转染后对HepG2细胞的影响.

方法: 针对cyclinE基因序列构建表达siRNA的真核表达载体pSilencer3.1-H1hygro, 利用脂质体Metafectene转染cyclinE基因高表达的肝癌细胞株HepG2. 流式细胞仪检测细胞周期及凋亡率, MTT法检测细胞增殖活性, RT-PCR和Western blot法观察转染后细胞cyclinE基因表达.

结果: 成功构建了表达siRNA的真核质粒载体, 转染后cyclinE基因mRNA及蛋白表达水平分别下降了79%和65%.

结论: 靶向cyclinE基因的siRNA可有效沉默HepG2细胞高表达的cyclinE基因, 从而抑制肝癌细胞的增殖并促进凋亡.

Keywords: 肝癌; 细胞周期蛋白E; RNA干扰