Published online 2007-10-28. doi: 10.11569/wcjd.v15.i30.3178
修回日期: 2007-10-12
接受日期: 2007-10-28
在线出版日期: 2007-10-28
目的: 探讨COX-2抑制剂和survivin 反义寡核苷酸联合应用对胰腺癌BxPC-3细胞的抗肿瘤效应及其可能机制.
方法: 应用胰腺癌BxPC-3细胞进行研究, 将BxPC-3细胞分为4组: A组(对照组), B组(Celecoxib 80 μmol/L)组, C组(300 nmol/L survivin ASODN), D组(80 μmol/L celecoxib+300 nmol/L survivin ASODN). 采用MTT检测细胞增殖, 流式细胞仪检测细胞凋亡率, caspase-3试剂盒检测caspase-3活性, 并用RT-PCR检测Bcl-2、survivin 和Mcl-1的mRNA的变化.
结果: 将80 μmol/L celecoxib 和300 nmol/L survivin反义寡核苷酸单独或联合作用于胰腺癌BxPC-3细胞24 h和48 h, D组细胞的存活率明显低于B, C组(24 h: 41.0%±0.4% vs 71.0%±2.2%, 63.3%±4.5%; 48 h: 34.2%±1.1% vs 61.6%±1.7%, 55.0%±3%; P<0.01). 作用24 h后, 流式细胞仪检测细胞凋亡率显示, D组细胞的凋亡率明显高于B, C组(30.33%±3.49% vs 11.93%±1.17%, 22.07%±0.93%; P<0.01). caspase-3活性在B, C, D组明显高于对照组(0.04867±0.0021, 0.02967±0.0021, 0.08767±0.0042 vs 0.007±0.0001; P<0.01), D组细胞的caspase-3活性明显高于B, C组(0.08767±0.0042 vs 0.04867±0.0021, 0.02967±0.0021; P<0.01). 用100 μmol/L塞来昔布作用于胰腺癌BxPC-3细胞24 h后, survivin/β-actin和Mcl-1/β-actin的mRNA的比值明显低于对照组(0.68±0.05 vs 1.05±0.06, P<0.01), 而Bcl-2/β-actin的mRNA的比值无明显变化(0.99±0.02 vs 1.07±0.06, P>0.05).
结论: 联合应用COX-2抑制剂塞来昔布和survivin反义寡核苷酸可明显诱导胰腺癌细胞的凋亡, 抑制细胞增殖, 并能够明显提高caspase-3活性. COX-2抑制剂塞来昔布诱导细胞凋亡可能通过survivin和Mcl-1途径, 而非Bcl-2途径.