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HBV相关性肝细胞癌及肝硬化患者外周血单个核细胞质谱分析
钟白云, 范学工, 黄燕, 邹明祥, 中南大学湘雅医院感染病科 湖南省长沙市 410008
刘蔚东, 中南大学湘雅医院卫生部肝胆肠外科研究中心 湖南省长沙市 410008
钟白云, 1998年中南大学湘雅医学院硕士, 副教授, 现在中南大学湘雅医院攻读博士, 从事肝癌的早期诊断及感染与免疫的研究.
通讯作者: 范学工, 410008, 湖南省长沙市湘雅路87号, 中南大学湘雅医院感染病科. xgfan@hotmail.com
电话: 0731-4327392
收稿日期: 2006-08-22
修回日期: 2006-09-01
接受日期: 2006-09-25
在线出版日期: 2007-01-28
修回日期: 2006-09-01
接受日期: 2006-09-25
在线出版日期: 2007-01-28
Abstract
目的: 建立HBV相关性肝细胞癌(HCC)及肝硬化(LC)患者外周血单个核细胞(PBMC)的双向凝胶电泳图谱, 并识别鉴定其差异表达的蛋白质.
方法: 利用固相pH梯度双向凝胶电泳分离HBV相关性HCC(n = 16)及LC患者(n = 12)PBMC的总蛋白质, 凝胶经蓝银显色后, PDQuest图像分析软件进行比较分析、识别差异表达的蛋白质, 应用基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(MALDI -TOF-MS)得到相应的肽质指纹图谱, 然后搜索数据库鉴定部分差异蛋白质点.
结果: 得到了分辨率较高、重复性较好的HBV相关性HCC及LC患者PBMC双向凝胶电泳图谱, HBV相关性HCC及LC患者PBMC凝胶的平均蛋白质点数分别为1186±43及1013±41; 组内的平均匹配率分别为91.6%, 90.2%. 对27个差异蛋白质点进行了质谱分析, 鉴定出16个蛋白质, 在HBV相关性HCC患者PBMC中表达明显增强的有热休克蛋白质(HSP)27、ras癌基因家族(RAB14)、肌动蛋白、α1-抗胰蛋白及RNA结合蛋白调节亚基等13个蛋白点; 而PDX6、HSPA8及锰超氧化物歧化酶(MnSOD)在HCC患者PBMC中低表达. 这些差异蛋白质点包括蛋白质合成与分解、分子伴侣、解毒和DAN修复相关蛋白质、三大代谢相关酶类、细胞结构相关蛋白质以及信号传导相关蛋白质六类.
结论: 建立了分辨率高且重复性较好的HBV相关性HCC及LC患者PBMC双向凝胶电泳图谱, 并识别鉴定出了一些与HBV相关性HCC癌变相关的差异表达的蛋白质.
Keywords: 肝细胞癌; 乙型肝炎病毒; 单个核细胞; 肝硬化; 蛋白质组; 基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱