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世界华人消化杂志. 2007-10-08; 15(28): 2972-2976
Published online 2007-10-08. doi: 10.11569/wcjd.v15.i28.2972
Published online 2007-10-08. doi: 10.11569/wcjd.v15.i28.2972
人参皂苷单体Rh2诱导小鼠前胃癌细胞系凋亡的分子机制
吴歌, 杨世杰, 吉林大学基础医学院药理学教研室 吉林省长春市 130021
吴歌, 在读博士研究生, 主要从事肿瘤分子药理学的研究.
通讯作者: 杨世杰, 130021, 吉林省长春市, 吉林大学基础医学院药理教研室. jcyaoli@sina.com
电话: 0431-85619799
收稿日期: 2007-06-14
修回日期: 2007-09-24
接受日期: 2007-09-28
在线出版日期: 2007-10-08
修回日期: 2007-09-24
接受日期: 2007-09-28
在线出版日期: 2007-10-08
Abstract
目的: 观察人参皂苷Rh2(G-Rh2)诱导小鼠前胃癌MFC细胞的凋亡, 探讨Ca2+在G-Rh2诱导细胞凋亡中的作用, 揭示G-Rh2诱导MFC细胞凋亡的分子机制.
方法: 分别对无血清培养24 h后的MFC正常细胞组、G-Rh2(3、10、30 mg/L)给药组、Ca2+螯合剂BAPTA(20 μmol)+G-Rh2(10 mg/L)给药组及BAPTA(20 μmol)组, 荧光显微镜(Hoechst 33 258)观察细胞形态学改变; 流式细胞仪Annexin V-FITC双染法检测细胞早期凋亡率; 琼脂糖凝胶电泳法观察细胞晚期凋亡; 共聚焦显微镜分析G-Rh2给药后细胞内钙和细胞线粒体膜电位, Western blot分析caspase 3的表达.
结果: 10 mg/L的G-Rh2能显著抑制无血清培养的MFC细胞增殖和诱导MFC细胞凋亡, 可剂量和时间依赖性的提高细胞内钙浓度, 降低细胞线粒体膜电位, 增加caspase 3的表达, 但这些作用均可被BAPTA(20 μmol)抑制.
结论: G-Rh2可激活细胞内Ca2+信号转导途径, 从而最终通过线粒体凋亡途径诱导胃癌细胞凋亡.
Keywords: 人参皂苷单体Rh2; 凋亡; 胃癌; 流式细胞仪; 免疫印迹