Published online 2007-08-08. doi: 10.11569/wcjd.v15.i22.2377
修回日期: 2007-07-03
接受日期: 2007-07-28
在线出版日期: 2007-08-08
目的: 研究livin特异性小分子干扰RNA (siRNA)沉默胃癌SGC-7901细胞livin基因及对促胃癌细胞凋亡的影响.
方法: 设计针对人源livin基因的两条SiRNA: si-livin1和si-livin2, 分别转染至对数生长期的胃癌SGC-7901细胞; 逆转录酶链式反应(RT-PCR)检测转染前后胃癌SGC-7901细胞livin基因表达的变化, MTT法检测转染前后该细胞对5-FU、顺铂的半数抑制浓度(IC50)的变化以及检测转染前后细胞增殖能力的变化, PI染色后流式细胞仪检测转染前后细胞凋亡的变化.
结果: livin特异性siRNA转染胃癌SGC-7901细胞48 h后, si-livin1组livin α mRNA(灰度值表示)表达较空白对照组和阴性对照组显著减少(livin α: 0.167±0.013 vs 0.403±0.036, 0.389±0.053; livin β: 0.181±0.028 vs 0.413±0.041, 0.404±0.029, 均P<0.01). 而si-livin2组livin mRNA表达相比于空白对照组和阴性对照无显著差异; 转染siRNA后, si-livin1组胃癌细胞生长缓慢, 生长曲线较对照组平缓; si-livin1组细胞对5-FU和顺铂半数抑制浓度IC50较空白对照组和阴性对照组显著降低(5-FU: 34.07±2.98 vs 74.39±4.91, 69.85±4.57; 顺铂: 4.56±0.35 vs 9.07±0.44, 7.96±0.64, 均P<0.01); 转染siRNA后, si-livin1组胃癌细胞自发凋亡率较空白对照组和阴性对照组增加(11.07±1.36 vs 3.54±2.89, 6.72±1.77, P<0.01, P<0.05). 5-FU和顺铂作用后, si-livin1组胃癌细胞凋亡率较空白对照组和阴性对照组显著增加(5-FU: 34.90±1.76 vs 11.54±0.83, 13.54±2.55; 顺铂: 48.14±2.70 vs 14.51±0.35, 15.71±0.34, 均P<0.01).
结论: RNA干扰可有效沉默livin基因表达从而抑制胃癌SGC-7901细胞生长及增加该细胞凋亡敏感性, livin可能成为胃癌凋亡治疗途径的一个分子靶点.