基础研究
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世界华人消化杂志. 2007-05-28; 15(15): 1695-1700
Published online 2007-05-28. doi: 10.11569/wcjd.v15.i15.1695
胎盘滋养层细胞的感染和凋亡与HBV的宫内传播机制
白菡, 张琳, 何丽霞, 冯国和, 石理兰, 窦晓光, 赵桂珍
白菡, 张琳, 冯国和, 石理兰, 窦晓光, 赵桂珍, 中国医科大学附属盛京医院感染科 辽宁省沈阳市 110004
何丽霞, 中国医科大学附属盛京医院妇产科 辽宁省沈阳市 110004
白菡, 博士, 讲师, 主要从事乙型肝炎病毒的母婴传播机制研究.
基金项目: 辽宁省自然科学基金资助项目, No. 9910500706.
通讯作者: 窦晓光, 110004, 辽宁省沈阳市, 中国医科大学附属盛京医院感染科. baihan910@163.com
电话: 024-83956961 传真: 024-83955089
收稿日期: 2007-03-27
修回日期: 2007-04-01
接受日期: 2007-04-13
在线出版日期: 2007-05-28
Abstract

目的: 通过HBV感染体外培养的人绒毛膜滋养层细胞, 探讨HBV宫内感染发生的机制.

方法: 对人早孕绒毛膜滋养层细胞进行原代培养和对人滋养层细胞系JEG-3进行传代培养, 将HBV感染血清与原代及传代培养细胞共同孵育8-48 h, 倒置显微镜观察细胞形态及细胞间连接, 细胞免疫荧光和免疫组织化学染色方法检测滋养层细胞中HBsAg和HBcAg的表达, 荧光定量PCR方法检测被感染的滋养层细胞中的HBV DNA, TUNEL方法检测滋养层细胞的凋亡.

结果: 与HBV阳性血清共同孵育对滋养层细胞的形态和细胞间连接无明显影响; 细胞免疫荧光和免疫组织化学染色结果显示, 滋养层细胞与HBV感染血清共同孵育(8, 24, 48 h)后, 滋养层细胞可以出现HBsAg和HBcAg的阳性表达, 24 h时HBsAg阳性细胞数量最多(8 h: 18.0%±3.67%; 24 h: 30.6%±2.88%; 48 h: 24.8%±4.21%); 荧光定量PCR方法检测到被感染的滋养层细胞中HBV DNA的存在; TUNEL结果显示, 与HBV感染血清共同孵育可导致滋养层凋亡细胞数量逐渐增加(24 h: 18.6 %±3.05%; 48 h: 26.8%±2.86%; P<0.01).

结论: 滋养层细胞的感染可能是HBV通过胎盘屏障的途径之一; HBV感染可以诱导滋养层细胞产生凋亡, 这可能是胎盘屏障阻止HBV宫内感染的一种保护性机制.

Keywords: 乙型肝炎病毒; 人绒毛膜滋养层细胞系JEG-3; 细胞免疫荧光; 免疫组化; 荧光定量聚合酶链式反应; 原位缺口末端标记技术; 宫内传播