基础研究
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世界华人消化杂志. 2007-05-18; 15(14): 1596-1601
Published online 2007-05-18. doi: 10.11569/wcjd.v15.i14.1596
真核表达载体pcDNA3-CTLA4Ig转染小鼠对移植胰岛功能的影响
赵国华, 孙宏治, 钟鑫平, 张金祥, 许国岩, 赵宁, 程颖, 张佳林, 刘永锋
赵国华, 孙宏治, 钟鑫平, 赵宁, 程颖, 张佳林, 刘永锋, 中国医科大学附属第一医院器官移植科 辽宁省沈阳市 110001
张金祥, 许国岩, 解放军65735部队医院内科 辽宁省丹东市 118002
赵国华, 2006年中国医科大学博士毕业, 主治医师, 主要从事消化系统疾病的研究.
基金项目: 辽宁省自然科学基金资助项目, No. 20042096.
通讯作者: 赵国华, 110001, 辽宁省沈阳市和平区南京北街155号, 中国医科大学附属第一医院器官移植科. zgh1975070707@163.com
电话: 024-82001796
收稿日期: 2007-01-30
修回日期: 2007-02-01
接受日期: 2007-02-13
在线出版日期: 2007-05-18
Abstract

目的: 探讨真核表达载体pcDNA3-CTLA4Ig转染受体小鼠肌细胞后对胰岛移植后排斥反应的影响.

方法: 受体C57BL/6小鼠随机分为对照组、空白转染组和实验组(转染pcDNA3-CTLA4Ig). Western blot检测受体小鼠血清CTLA4-Ig表达, 观察移植物存活时间, 术后7 d取受体肾脏做HE染色及胰岛素免疫组化染色, 采用微量全血3H-胸腺嘧啶掺入法检测单个核细胞在刀豆蛋白A刺激下的增殖程度, 流式细胞仪检测外周血T细胞亚群表达情况.

结果: 受体小鼠转染5 d后, Western blot检测到血清内有CTLA4Ig表达, 转染效率为27.50%; 实验组小鼠血糖维持正常时间明显延长(P<0.05); 术后7 d, 转染组单个核细胞在刀豆蛋白刺激下的增殖程度明显降低(P<0.05), CD4+、CD8+ T淋巴细胞表达与对照组和空白转染组相比有显著差异差异(CD4+: 14.38%±0.84% vs 20.56%±0.68%, 21.04%±1.14%, P<0.05; CD8+: 14.77%±0.92% vs 24.63%±1.30%, 23.84%±1.21%, P<0.05), 小鼠肾被膜下胰岛素免疫组化染色强度明显增高.

结论: 利用脂质体法可将pcDNA3-CTLA4Ig转染到活体小鼠肌细胞内并在小鼠体内表达CTLA4Ig, 从而阻断B7/CD28共刺激信号途径, 抑制胰岛移植术后排斥反应.

Keywords: 胰岛移植; 排斥反应; 共刺激信号; B7/CD28