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世界华人消化杂志. 2007-05-08; 15(13): 1482-1487
Published online 2007-05-08. doi: 10.11569/wcjd.v15.i13.1482
Published online 2007-05-08. doi: 10.11569/wcjd.v15.i13.1482
不同转移潜能肝癌细胞株的差异蛋白质组的二维液相色谱分析
彭艳, 蒋平, 焦炳华, 第二军医大学基础医学部生物化学与分子生物学教研室 上海市 200433
张霞, 上海交通大学药学院 上海市 200240
王葵, 第二军医大学东方肝胆外科医院 上海市 200438
彭艳, 倪健, 上海晨健抗体组药物有限公司 201203
彭艳, 第二军医大学生物化学与分子生物学博士, 上海张江高科技园区企业博士后, 主要从事肿瘤相关蛋白功能研究.
基金项目: 上海市科学技术委员会资助课题, No. 054319938.
通讯作者: 倪健, 201203, 上海市李冰路306号, 上海晨健抗体组药物有限公司. jiannihome@yahoo.com
电话: 021-51388210 传真: 021-51388211
收稿日期: 2007-01-31
修回日期: 2007-02-04
接受日期: 2007-02-22
在线出版日期: 2007-05-08
修回日期: 2007-02-04
接受日期: 2007-02-22
在线出版日期: 2007-05-08
Abstract
目的: 对不同转移潜能肝癌细胞株MHCC97- H(高转移)和MHCC97-L(低转移)差异表达的蛋白质进行二维液相色谱分离和MALDI-TOF质谱鉴定.
方法: 将肝癌细胞株MHCC97-H和MHCC97- L细胞裂解样品按蛋白质PI进行一维的色谱聚焦分离, 然后每个PI组分再按疏水性经二维反相无孔硅胶HPLC分离, 利用ProteoVue软件将UV光吸收图谱转换成PI对疏水性的胶图, 再利用DeltaVue软件比较升高或降低的差异蛋白. 收集差异蛋白峰进行胰酶酶解, 然后进行MALDI-TOF质谱鉴定.
结果: 2D图谱显示共有72个差异蛋白条带, 共鉴定出了9个差异蛋白, 分别为M2型丙酮酸激酶、ATP合成酶α亚单位、热休克蛋白60、Toll样受体9、含黄素单加氧酶、钙网硬蛋白前体、锰超氧化物岐化酶、nm23-H1、G-蛋白偶连受体激酶5; 其中4个蛋白在高转移细胞株MHCC97-H中表达升高, 5个蛋白在低转移细胞株MHCC97-L表达升高.
结论: 这些差异蛋白可能在肝癌的转移中起关键作用.
Keywords: 蛋白质组; 肝细胞癌; 肿瘤转移; 二维液相色谱分离; MALDI-TOF质谱