基础研究
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世界华人消化杂志. 2007-05-08; 15(13): 1470-1474
Published online 2007-05-08. doi: 10.11569/wcjd.v15.i13.1470
反义RNA对胃癌细胞MT1-MMP基因表达和侵袭性的抑制作用
胡楠, 周晓武, 付汉江, 邢瑞云, 孔维, 郑晓飞
胡楠, 周晓武, 中国人民解放军空军总医院普通外科 北京市 100036
付汉江, 邢瑞云, 郑晓飞, 军事医学科学院放射医学研究所 北京市 100850
胡楠, 孔维, 吉林大学生命科学学院 吉林省长春市 130023
胡楠, 在读硕士研究生, 主要进行基因治疗的研究.
基金项目: 空军"十一五"重点科研课题资助项目, No. KJZ20013022.
通讯作者: 周晓武, 100036, 北京市海淀区阜成路30号, 中国人民解放军空军总医院普通外科. drzhouxiaowu@sina.com
电话: 010-68410099-6301
收稿日期: 2007-01-18
修回日期: 2007-02-04
接受日期: 2007-02-13
在线出版日期: 2007-05-08
Abstract

目的: 膜研究膜型-1基质金属蛋白酶(MT1-MMP)反义RNA对人胃癌细胞BGC823靶基因表达和侵袭特性的影响.

方法: 利用基因重组技术构建人MT1-MMP反义RNA真核表达载体, 转染人胃癌细胞BGC823, 应用RT-PCR、MTT、明胶酶谱和体外侵袭实验等方法观察人胃癌细胞BGC823转染前后, MT1-MMP mRNA表达水平、细胞生长、明教酶A活性及细胞体外侵袭能力等指标的变化．

结果: 成功构建了MT1-MMP反义RNA真核表达载体pasMMP14, 将其转染胃癌细胞BGC823后, 与阴性对照组相比, 实验组MT1-MMP mRNA表达水平降低, 抑制率为36%. 转染48 h, 明教酶A的活化受到了明显抑制. 转染72 h, 细胞增殖明显受抑(t = 2.358, P<0.01 vs 空白组; t = 2.727 P<0.01 vs 阴性组). 实验组的穿膜细胞数明显低于空白对照组和阴性对照组(t = 5.744, P<0.01; t = 5.695, P<0.01).

结论: 反义RNA对人胃癌细胞MT1-MMP基因表达和侵袭能力具有明显的抑制作用, MT1-MMP基因可作为胃癌抗侵袭治疗的分子靶点．

Keywords: 膜型1-基质金属蛋白酶; 反义RNA; 人胃癌细胞; 逆转录-聚合酶链反应; MTT法; 明胶酶谱; 体外侵袭实验