大鼠非酒精性脂肪肝造模方法的改进

Abstract

目的: 快速建立一种非酒精性脂肪肝大鼠模型.

方法: 24只♂SD大鼠随机平均分为正常组、常规组和改良组, 分别喂普通基础饲料、常规用高脂饲料及常规高脂饲料+蔗糖+丙基硫氧嘧啶+胆酸钠. 5 wk内动态观察三组大鼠的一般情况、体质量变化, 均5 wk处死, 观察大鼠肝脏病理形态变化, 苏丹Ⅳ染色和电镜检测了解大鼠肝细胞胞质内脂滴存在情况, 并比较三组大鼠血清甘油三酯(TG)、胆固醇(TC)、谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)水平、丙二醛(MDA)含量和超氧化物歧化酶(SOD)活力及肝组织甘油三酯(TG)、胆固醇(TC)含量的变化.

结果: 第4周开始正常组和改良组两组大鼠与常规组体质量之间有显著性差异(249.63±34.25, 241.88±20.75 vs 275.38±6.59, P<0.05), 改良组与正常组之间体质量无显著性差异(P>0.05). 第5周在光镜下见改良组大鼠肝细胞内弥漫大量的脂肪空泡, 电镜和苏丹Ⅳ染色证实肝细胞内有大量脂滴. 肝脂肪变性程度为+~+++ (H = 13.36, P = 0.0003), 正常组和常规组大鼠肝细胞内未见明显脂肪变性. 改良组大鼠血清TG, TC, ALT水平和MDA含量均高于正常组和常规组(TG: 1.28±0.61 mmol/L vs 0.72±0.12, 0.76±0.04 mmol/L; TC: 12.78±1.47 mmol/L vs 1.71±0.03, 2.31±0.49 mmol/L; ALT: 1518.64±186.04 nkat/L vs 1181.57±37.84, 1262.92±159.20 nkat/L; MDA: 13.40±4.24 μmol/L vs 5.89±1.05, 7.23±1.15 μmol/L; 均P<0.05), 常规组与正常组比无显著差异(P>0.05); 而改良组血清SOD活力显著低于正常组和常规组(5.21±0.81 nkat/mL vs 11.91±2.69, 11.19±0.78 nkat/mL, P<0.05). 肝组织TG, TC含量常规组和模型组均比正常组有增高(TG: 2.14±0.26, 5.83±1.42 mmol/L vs 1.20±0.16 mmol/L, P<0.05; TC: 3.19±0.23, 9.63±1.12 mmol/L vs 2.13±0.16 mmol/L, P<0.05), 常规组与改良组也有显著差异(P<0.05).

结论: 通过与利用常规高脂饲料建模的方法比较, 该改良方法5 wk成功地构建了非酒精性脂肪肝大鼠模型, 缩短了建模时间, 降低了实验成本且模型基本符合人类发病的自然状态, 是一种理想的建模方式.

Keywords: 非酒精性脂肪肝; 动物模型; 丙基硫氧嘧啶; 大鼠