Published online 2007-04-08. doi: 10.11569/wcjd.v15.i10.1060
修回日期: 2007-01-10
接受日期: 2007-01-23
在线出版日期: 2007-04-08
目的: 研究白花蛇舌草总黄酮(flavonoids from Hedyotis diffusa willd., FHD)抑制人肝癌细胞SMMC-7721的靶基因调控.
方法: 分别提取人正常肝细胞、人肝癌SMMC-7721细胞和FHD作用后的SMMC- 7721细胞的总RNA, 逆转录合成单链、双链cDNA后, 体外转录合成生物素标记的cRNA与人HO4基因表达谱芯片杂交, 扫描杂交芯片图像, 利用软件获得FHD抗肝癌的靶基因, 对靶基因进行生物信息学分析.
结果: 共找到20条FHD抑制肝癌细胞的有效靶基因, 即给予FHD后, 通过上调或下调, 这些显著异常表达的基因被恢复至正常水平. 其中, 癌基因pim-1(Hs.81170)、rel(Hs.858)、ras(Hs.204354)、fos(Hs.25647)、myc (Hs.79070)、met(Hs.285754)以及编码Bcl-2相关蛋白的基因(Hs.227817)被显著下调; 成纤维细胞生长因子(Hs.284244)、胰岛素样生长因子1受体(Hs.239176)、胰岛素样生长因子结合蛋白(Hs.1516)、G蛋白偶联受体(Hs.23016)、酪氨酸蛋白磷酸化酶(Hs.227777)、转录因子12(Hs.21704)、转录因子CP2(Hs.154970)等与细胞生长相关的信号转导分子被显著下调; 细胞因子IL-1(Hs.1722)被显著下调; 丝裂原活化的蛋白激酶(MAPK)信号传导通路成员MAP2K6(Hs.118825)和MAP3K12(Hs.211601)被显著上调; 抑癌基因NF-2(Hs.902)被显著上调; 编码T细胞活化共刺激信号分子的TNFSF9(Hs.1524)、TNFSF7(Hs.99899)基因被显著上调. 这些基因均与肝癌的发生、发展密切相关.
结论: FHD抑制SMMC-7721细胞的作用由多条靶基因协同, 并通过胞内、胞外信号转导途径协调完成.