基础研究
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世界华人消化杂志. 2006-03-28; 14(9): 858-862
Published online 2006-03-28. doi: 10.11569/wcjd.v14.i9.858
轮状病毒NSP4基因在非复制型腺病毒载体中的表达及免疫活性
王大燕, 王健伟, 王彦斌, 魏强, 屈建国, 洪涛
王大燕, 王健伟, 王彦斌, 魏强, 屈建国, 洪涛, 中国疾病预防控制中心病毒病预防控制所 北京市 100052
王大燕, 博士, 中国疾病预防控制中心病毒病预防控制所助理研究员, 主要从事分子病毒学研究.
基金项目: 国家自然科学基金资助项目, No. 30000145, 30370066; 国家863计划资助项目, No. 2003AA215071.
通讯作者: 王健伟, 100052, 中国疾病预防控制中心病毒病预防控制所, 现在北京东单三条9号, 中国医学科学院病原生物学研究所. wangjw28@vip.sina.com
电话: 010-63511368
收稿日期: 2006-02-07
修回日期: 2006-02-10
接受日期: 2006-02-13
在线出版日期: 2006-03-28
Abstract

目的: 研究以非复制型重组腺病毒表达人轮状病毒NSP4基因作为新型轮状病毒基因疫苗的可行性.

方法: 用AdEasy系统构建表达NSP4蛋白的重组腺病毒, 并通过形态学观察、PCR、RT-PCR、Southern blot和Western blot等对重组腺病毒进行鉴定. 通过滴鼻途径免疫♀小鼠, 对免疫后母鼠生产的乳鼠(4日龄)用SA11株轮状病毒灌胃攻击, 观察腹泻的产生情况并进行腹泻评级.

结果: 获得了重组腺病毒rvAdEasyNSP4. Southern blot表明, 在重组腺病毒中确有特异性的NSP4基因整合, Western blot证明, 目的蛋白得到表达. 初次免疫小鼠后血清IgG抗体的滴度可达1:1 000, 但阳转率仅为28.5%; 再次免疫后, 血清抗体阳转率达到了85.7%; 第3次免疫后, 血清抗体阳转率达到100%. 血清IgA阳转率可以达到71.4%. 实验组乳鼠攻毒后腹泻的百分率和腹泻评分(反应腹泻严重程度)均较对照组低.

结论: 腺病毒载体可有效表达轮状病毒非结构蛋白NSP4并可有效诱导小鼠免疫反应, 这些结果的取得为新型轮状病毒疫苗的研制提供了依据.

Keywords: 轮状病毒; NSP4; 腺病毒载体; 免疫