树突状细胞和调节性T细胞在自身抗原所致小鼠免疫耐受模型中的作用

Abstract

目的: 探讨树突状细胞(DC)及CD4⁺CD25⁺调节性T细胞在胰岛素自身抗原sc所诱导的小鼠胰岛素依赖性糖尿病(IDDM)的免疫耐受中的重要作用.

方法: 低剂量链脲佐菌素(STZ)(40 mg/kg)ip连续5次在Balb/c小鼠体内建立IDDM模型, 胰岛素(100 μg)与不完全弗氏佐剂(IFA, 1∶1)混合液sc 1次/wk, 连续4 wk. 模型建立后每周测定血糖, 5 wk时处死动物, 取胰腺进行病理组织学检查. 分离骨髓DC前体及脾脏T淋巴细胞并进行体外培养. 采用流式细胞术测定DC表型和CD4⁺CD25⁺调节性T细胞, 以同种淋巴细胞刺激实验检测DC刺激淋巴细胞增殖功能.

结果: 胰岛素sc 4 wk后可明显降低小鼠的血糖, 与模型对照组有极显著差异(13.79±2.71 mmol/L vs 20.98±1.43 mmol/L, P<0.05), 胰岛内炎症细胞浸润减少, 组织结构完整. IDDM模型建立后, 小鼠骨髓来源树突状细胞CD11c表达为26.4%, DC分化异常, 而正常小鼠CD11c表达为47.5%; 混合淋巴细胞反应中DC刺激能力减弱, 刺激指数分别为1.47±0.01和1.32±0.01(刺激细胞和反应细胞比例分别为1∶10和1∶20), 与正常小鼠相比, 差别具有极显著性意义(P值均小于0.01). 脾脏CD4⁺CD25⁺调节性T细胞减少到1.43%, 而正常小鼠为5.09%. 与此相反, 胰岛素自身抗原连续应用后, 不仅使血糖得到控制, 表达CD11c的树突状细胞数量增加, CD86和MHC-Ⅱ表面分子表达降低到26.6%和28.8%, 刺激淋巴细胞反应的能力弱于正常DC, 但强于模型小鼠的DC, 刺激指数分别为2.30±0.06(1∶10)和2.17±0.02(1∶20), CD4⁺CD25⁺调节性T细胞数量上升到7.15%.

结论: 胰岛素sc可预防STZ所致小鼠IDDM的发生, 自身抗原可以通过改善功能异常的树突状细胞, 诱导CD4⁺CD25⁺调节性 T细胞分化在模型小鼠体内建立免疫耐受.

Keywords: 自身抗原; 树突状细胞; 调节性T细胞; 1型糖尿病