基础研究
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世界华人消化杂志. 2006-03-08; 14(7): 676-681
Published online 2006-03-08. doi: 10.11569/wcjd.v14.i7.676
槟榔碱促结肠平滑肌细胞收缩及对胞内钙离子浓度的影响
梁宁霞, 衣兰娟, 田琳, 胡凡, 刘翠萍, 魏睦新
梁宁霞, 衣兰娟, 田琳, 魏睦新, 南京医科大学第一附属医院中医科 江苏省南京市 210029
刘翠萍, 南京医科大学第一附属医院内分泌科 江苏省南京市 210029
胡凡, 南京医科大学 江苏省南京市 210029
梁宁霞, 2005年南京医科大学硕士, 讲师, 主要从事胃肠动力方面研究.
基金项目: 江苏省科技厅国际合作项目, No. BZ2002066; 江苏省"135"工程重点人才项目, No. RC2002049.
通讯作者: 魏睦新, 210029, 江苏省南京广州路300号, 南京医科大学第一附属医院中医科.
收稿日期: 2005-12-24
修回日期: 2006-01-05
接受日期: 2006-02-11
在线出版日期: 2006-03-08
Abstract

目的: 观察氢溴酸槟榔碱(Ah)促进培养的结肠平滑肌细胞收缩作用及对胞内游离Ca2+浓度的影响.

方法: 培养大鼠结肠平滑肌细胞, 分为4组: 正常对照组、Ah刺激组、乙酰胆碱(Ach)刺激组、阿托品预处理组. 应用特异性Ca2+荧光批示剂Fluo-3/AM负载细胞, 激光共聚焦显微镜检测游离Ca2+浓度和细胞收缩率.

结果: 正常对照组细胞未发生自主性收缩, 因指示剂的衰减, 荧光强度(FI)有递减的趋势; Ah刺激组在加药后短时间内胞内钙离子浓度迅速升高, 出现一个波峰, FI平均基础值与峰值有差异(P<0.05), 而后胞内钙离子浓度再缓慢攀升, 在484.0±47.6 s达到高峰, 而后有一个较长时间的平台期, 在1 400 s左右恢复至静息水平, FI基础值与峰值有显著差异(P<0.01), 细胞收缩百分数为20.70%±0.07%; Ach刺激组在加药后胞内钙离子浓度升高, 形成一个小波峰, FI基础值和峰值差异有显著性(P<0.01). 随后胞内钙离子浓度缓慢攀升, 在600 s左右达到高峰, 而后有一个较长时间的平台期. FI基础值与峰值差异有显著性(P<0.001); 经阿托品预孵育处理后的细胞, 加入Ah后, 其收缩效应被完全抑制.

结论: Ah可引起结肠平滑肌细胞收缩, 升高细胞内游离Ca2+浓度. 其收缩效应可以被M受体阻断剂阿托品所抑制.

Keywords: 结肠; 平滑肌细胞; 细胞培养; 槟榔碱; 钙离子; 激光共聚焦显微镜