基础研究
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世界华人消化杂志. 2006-03-08; 14(7): 655-659
Published online 2006-03-08. doi: 10.11569/wcjd.v14.i7.655
VEGF基因表达抑制对胃腺癌细胞SGC-7901增殖的影响
徐文华, 葛银林, 徐宏伟, 王秀丽, 耿芳宋
徐文华, 葛银林, 徐宏伟, 王秀丽, 耿芳宋, 青岛大学医学院生物化学与分子生物学教研室 山东省青岛市 266021
徐文华, 女, 1972-09-15生, 山东省青岛市人, 汉族, 青岛大学医学院硕士研究生.
基金项目: 青岛市科技局科技计划项目, 03-1-NY-14.
通讯作者: 葛银林, 266021, 山东省青岛市登州路38号, 青岛大学医学院生物化学与分子生物学教研室. geyinlin@126.com
电话: 0532-82991209 传真: 0532-82991009
收稿日期: 2005-12-28
修回日期: 2006-02-05
接受日期: 2006-02-10
在线出版日期: 2006-03-08
Abstract

目的: 研究siRNA(small interfering RNA)对人胃腺癌细胞SGC-7901的VEGF基因表达的影响.

方法: 选择血管内皮生长因子(VEGF)基因为靶基因, 设计两组针对VEGF mRNA的小干扰RNA, 合成DNA寡核苷酸链, 体外转录合成siRNA. 以人胃腺癌细胞系SGC-7901为靶细胞, 应用脂质体转染的方法, 将siRNA导入细胞. 采用Hoechst33258染色观察siRNA作用于SGC-7901细胞中出现凋亡小体的情况, 流式细胞仪检测细胞周期的改变, RT-PCR法比较转染前后VEGF mRNA表达水平的变化, ELISA法检测细胞培养液中VEGF蛋白分泌量的变化.

结果: 两组siRNA转染后均能有效地抑制SGC-7901细胞的生长, 诱导细胞凋亡产生凋亡小体. siRNA作用于SGC-7901细胞, 其细胞周期均发生了明显的变化, 主要表现为G0/G1期细胞增多, S期细胞减少, 并使细胞周期阻滞于G0/G1期(siRNA1组, siRNA2组G0/G1期 vs 对照组G0/G1期: 75.04%, 76.52% vs 58.37%, P<0.01; siRNA1组, siRNA2组S期 vs 对照组S期: 17.82%, 16.73% vs 39.52%, P<0.01), 而其他组则无明显变化. VEGF mRNA的表达量大幅度减少(siRNA1组, siRNA2组 vs 对照组: 0.638±0.078, 0.656±0.085 vs 0.941±0.046, P<0.01), 相对应的VEGF蛋白水平也显著降低(164.7±22.7, 166.3±26.6 vs 414.0±61.5, P<0.01), 而其他组siRNA转染后则无上述作用.

结论: 应用靶向VEGF基因RNA干扰技术可以有效抑制胃癌细胞SGC-7901的增殖.

Keywords: 胃癌; SGC-7901; RNA干扰; 血管内皮细胞生长因子