基础研究
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世界华人消化杂志. 2006-02-28; 14(6): 568-575
Published online 2006-02-28. doi: 10.11569/wcjd.v14.i6.568
克隆性分析技术在肝脏局灶性结节性增生诊断中的应用
巩丽, 张宏图, 张伟, 李爱宁, 刘杉, 孙耘田, 刘贵秋, 苏勤
巩丽, 张伟, 李爱宁, 刘贵秋, 苏勤, 中国人民解放军第四军医大学唐都医院病理科 陕西省西安市 710038
张宏图, 刘杉, 孙耘田, 苏勤, 中国医学科学院中国协和医科大学肿瘤医院病理科 北京市 100021
巩丽, 2003年级第四军医大学唐都医院病理科硕士生.
基金项目: 国家自然科学基金资助项目, No. 30171052和No. 30572125.
通讯作者: 苏勤, 100021, 北京市潘家园南里17号, 中国医学科学院中国协和医科大学肿瘤医院病理科. q.su@wjgnet.com
电话: 010-87788435 传真: 010-67713359
收稿日期: 2005-12-27
修回日期: 2006-01-09
接受日期: 2006-01-13
在线出版日期: 2006-02-28
Abstract

目的: 探讨整个肝局灶性结节性增生(FNH)病变及各结节的克隆性, 以阐明其本质, 同时比较其与肝细胞腺瘤(HA)鉴别的克隆性组成.

方法: 女性肝脏标本3例共4个FNH病灶. 在病变区和非病变区取组织提取基因组DNA, 余标本制备石蜡切片, HE染色, 应用显微切割技术分离其中3个FNH内的小结节状病变, 提取基因组DNA, 经甲基化敏感的HpaⅡ或HhaⅠ消化, 巢式PCR扩增磷酸甘油酸激酶(PGK)和雄激素受体(AR)基因. 应用Bst XI酶切和琼脂糖凝胶电泳显示PGK基因的单核苷酸多态性; 应用变性聚丙烯酰胺凝胶电泳显示AR基因的CAG重复序列长度多态性. 2例HA和4例HCC作为肿瘤参照.

结果: 2例HA及4例HCC均为单克隆性. 4个FNH病变, 直径1.5-5.3 cm, 但缺乏特征性的中央星状瘢痕, 结果均显示为多克隆性病变; 其中的61个结节性病变中, 56个呈变异肝细胞结节(NAH)形态, 5个为普通再生结节. 克隆性分析结果显示, 56个NAH样病变中, 除4个未扩增成功外, 52个NAH中有21个(40.4%)显示X染色体失活嵌合性丢失, 提示为肿瘤性病变; 其中1例FNH的14个单克隆结节中, 有2个与其他病变失活带型不一致, 提示在同一FNH中, 存在着不同起源的NAH样病变. 5个普通肝细胞增生结节及病变周围肝组织均为多克隆组成.

结论: FNH是由无数个NAH构成的, 其整个病变是多克隆性, 但其中某些结节已经是肿瘤性增生. 克隆性检测有助于其与HA的鉴别, 而且所取样本必须是病变的整个切面或其大部分.

Keywords: 克隆性; 局灶性结节性增生; 诊断