基础研究
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世界华人消化杂志. 2006-02-18; 14(5): 497-501
Published online 2006-02-18. doi: 10.11569/wcjd.v14.i5.497
IL-24融合蛋白表达载体的构建及其对人小肠癌细胞的生长抑制作用
瞿少刚, 张秀萍, 陈群, 刘仿
瞿少刚, 陈群, 刘仿, 广东医学院微生物学及免疫学教研室 广东省湛江市　524023
张秀萍, 广东医学院实验中心 广东省湛江市　524023
瞿少刚, 男, 1971年出生, 湖北省广水市人, 汉族, 2005年武汉大学医学院硕士, 讲师, 主要从事微生物学和免疫学的教学与科研.
通讯作者: 瞿少刚, 524023, 广东省湛江市广东医学院微生物学及免疫学教研室. sgq9528@163.com
电话: 0759-2388583-6 传真: 0759-2284104
收稿日期: 2005-11-09
修回日期: 2005-11-15
接受日期: 2005-11-24
在线出版日期: 2006-02-18
Abstract

目的: 构建人白细胞介素-24(IL-24)基因的表达载体并在大肠杆菌中表达. 研究IL-24融合蛋白对人小肠癌细胞(HIC)的生长抑制作用.

方法: 用PCR从质粒TRAP-IL-24中扩增人IL-24 cDNA片段，并将该片段插入pGEX-KG原核表达载体中，实现插入基因的融合表达. 用SDS-PAGE和Western blot对表达产物进行鉴定。提取并纯化IL-24融合蛋白，以不同浓度与HIC细胞共培养72 h，同时设立相应浓度梯度的GST蛋白组、HIC细胞对照组及空白孔，采用MTT法检测各组人小肠癌细胞的体外增殖.

结果: 酶切结果证实, 成功地构建了pGEX-KG-IL-24原核表达载体，并在大肠杆菌中获得稳定的表达, 表达产物的相对分子质量(Mr)同预期值相一致，融合蛋白为Mr 53 000，GST蛋白为Mr 29 000. IL-24融合蛋白以浓度依赖性的关系抑制HIC细胞的生长，并且在20和40 mg/L时的抑制率明显高于GST蛋白.

结论: 成功地构建了重组表达载体pGEX-KG-IL-24, 并在E.coli BL21中表达. IL-24融合蛋白对HIC细胞生长有抑制作用.

Keywords: IL -24; 原核表达; GST-IL-24融合蛋白; 小肠癌细胞系HIC