Published online 2006-12-18. doi: 10.11569/wcjd.v14.i35.3409
修回日期: 2006-10-04
接受日期: 2006-10-11
在线出版日期: 2006-12-18
目的: 研究反义Snail转录因子体外抑制肝癌转移的作用.
方法: 采用RT-PCR技术分别检测肝癌细胞株HepG2中Snail mRNA和E钙黏蛋白(E-cadherin) mRNA的表达水平. 将HepG2细胞分为转染反义Snail质粒(反义组)和空载体质粒(对照组), 观察Snail对E-cadherin mRNA表达的逆转作用及对肝癌细胞体外侵袭、运动的抑制作用.
结果: Snail mRNA在HepG2细胞中有表达, E-cadherin mRNA在HepG2细胞中没有表达. HepG2细胞瞬时转染0, 24, 48 h时, Snail mRNA的表达水平分别为0.887±0.005, 0.665±0.010, 0.348±0.012; 同时, E-cadherin mRNA开始有表达, 分别为0, 0.160±0.001, 0.299±0.005, 各时间点间分别比较, 有显著性差异(P<0.05). HepG2细胞稳定转染后, 反义组、对照组Snail mRNA表达水平分别为0.131±0.010, 0.3577±0.020, 两组比较有显著性差异(P<0.05); 反义组E-cadherin mRNA开始有表达, 表达水平为0.476±0.030, 而对照组为0, 两组比较有显著性差异(P<0.01); 检测间质细胞标志物纤维连接蛋白mRNA的表达水平, 反义组显著低于对照组(0.201±0.010 vs 0.558±0.010, P<0.01). 体外细胞运动实验表明, 反义组、对照组跨膜细胞数分别为(48±2)个和(401±17)个, 有显著性差异(P<0.01). 重组细胞基底膜侵袭实验显示, 两组穿透基底膜细胞数分别为(39±8)个和(211±61)个, 显著性差异(P<0.05).
结论: 肝癌细胞中存在Snail mRNA与E-cadherin mRNA表达的负向关系, 抑制Snail mRNA的表达对肝癌细胞的侵袭和运动有抑制作用, 可能为肝癌的基因治疗提供新的靶点.