亚细胞毒性剂量As2O3增加胃癌细胞对rhTRAIL的敏感性及其机制

Abstract

目的: 研究亚细胞毒性剂量As₂O₃对rhTRAIL诱导胃癌细胞凋亡的影响及其机制.

方法: 人胃腺癌细胞株SGC7901以As₂O₃(1 μmol/L), rhTRAIL(500 μg/L)及两者联用处理; 采用AnnexinV-FITC和PI双染色流式细胞仪检测细胞凋亡; 用间接免疫荧光染色结合流式细胞技术检测细胞表面TRAIL R₁/DR₄和TRAIL R₂/DR₅分子表达; RT-PCR方法检测TRAIL R₁/DR₄和TRAIL R₂/DR₅ mRNA表达.

结果: rhTRAIL在单用或与As₂O₃联用时均可以诱导胃癌SGC7901细胞凋亡, 并且随着作用时间延长(12-72 h), 细胞凋亡率逐渐增高. As₂O₃与rhTRAIL联用24, 48, 72 h后, SGC7901细胞凋亡率分别显著高于单用rhTRAIL处理相同时间细胞(36.49%±7.12%, 47.13%±3.44%, 55.63%±7.16% vs 29.78%±3.18%, 38.56%±1.89%, 43.12%±6.23%, P<0.05); As₂O₃单用或联用rhTRAIL处理SGC7901细胞24 h后, 细胞表面TRAIL R₁/DR₄和TRAIL R₂/DR₅分子的平均荧光密度(MFI)较对照组细胞显著增加(R₁/DR₄: 29.44±4.29, 26.14±3.40 vs 13.45±3.81, P<0.05或P<0.01; R₂/DR₅: 28.04±0.79, 31.47±4.56 vs 16.45±5.07, P<0.05或P<0.01); 与此同时, TRAIL R₁/DR₄和TRAIL R₂/DR₅ mRNA表达水平增高.

结论: 亚细胞毒性剂量As₂O₃可能通过增加TRAIL R₁/DR₄和TRAIL R₂/DR₅基因表达、上调细胞表面TRAIL死亡受体从而增加胃癌细胞SGC7901对rhTRAIL的敏感性, 两药可能联合用于治疗胃癌.

Keywords: 肿瘤坏死因子相关的凋亡诱导配体; 三氧化二砷; 胃癌; 凋亡