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世界华人消化杂志. 2006-07-18; 14(20): 1956-1962
Published online 2006-07-18. doi: 10.11569/wcjd.v14.i20.1956
Published online 2006-07-18. doi: 10.11569/wcjd.v14.i20.1956
单一质粒四环素系统调控IL-24表达对胃癌细胞系的作用
林宁晶, 朱军, 北京大学临床肿瘤学院肿瘤内科 北京市 100036
林宁晶, 2001年北京大学第一医院硕士毕业, 2006年北京大学临床肿瘤学院博士毕业, 主要从事晚期实体瘤的治疗.
基金项目: 国家"十五"科技攻关计划项目资助 , No. 2002BA711A06 .
通讯作者: 朱军, 100036, 北京市海淀区阜成路52号, 北京大学临床肿瘤学院肿瘤内科. zhujun@csco.org.cn
电话: 010-88196118 传真: 010-88122437
收稿日期: 2006-05-20
修回日期: 2006-06-02
接受日期: 2006-06-09
在线出版日期: 2006-07-18
修回日期: 2006-06-02
接受日期: 2006-06-09
在线出版日期: 2006-07-18
Abstract
目的: 通过构建单一质粒四环素调控载体pCEP4-tetR-IL-24, 将其转染胃癌细胞系后, 探讨IL-24对胃癌细胞的初步作用以及此系统能否发挥四环素的调控作用.
方法: 将hIL-24基因片段从pORF9-hIL-24定向克隆至pcDNA4-TO-Xpress中, 再亚克隆到pCEP4-tetR中构建pCEP4-tetR-IL-24; 利用脂质体转染法转染细胞; Western blotting检测蛋白表达; MTT法与台盘蓝拒染法检测细胞增殖; annexinⅤ法检测细胞的凋亡.
结果: pCEP4-tetR-IL-24转染胃癌细胞系MGC803, BGC823与正常胃黏膜细胞系GES-1后, 在强力霉素诱导下均可表达IL-24蛋白; MGC803, BGC823细胞中, 强力霉素诱导组的增殖较未诱导组、空载体组与对照组明显受抑制(P<0.01, 0.001-0.006); 强力霉素诱导组与未诱导组相比, 凋亡细胞比例明显增多(23.5%/25.6%→33.8%/36.7%, P<0.01); GES-1中, 诱导组与未诱导组、空载体组及对照组的差异无统计学意义(P>0.05).
结论: IL-24可以抑制胃癌细胞增殖, 诱导胃癌细胞凋亡, 对正常胃黏膜上皮细胞无明显毒性; 构建的单一质粒四环素调控系统pCEP4-tetR-IL-24可以发挥四环素的调控作用.
Keywords: 四环素调控; 白细胞介素24; 胃癌; 增殖; 凋亡