基础研究
Copyright ©The Author(s) 2006. Published by Baishideng Publishing Group Inc. All rights reserved.
世界华人消化杂志. 2006-05-28; 14(15): 1462-1465
Published online 2006-05-28. doi: 10.11569/wcjd.v14.i15.1462
HBeAg结合蛋白4基因剪切体HBeBP4A的克隆化
张健康, 郭江, 成军, 王丹琼, 伦永志, 赵龙凤, 蓝贤勇, 洪源, 毛羽
张健康, 郭江, 成军, 王丹琼, 伦永志, 赵龙凤, 蓝贤勇, 洪源, 毛羽, 北京地坛医院传染病研究所 北京市 100011
张健康, 赵龙凤, 山西医科大学第一医院消化科 山西省太原市 030001
张健康, 山西医科大学2004级内科学博士生, 主要从事慢性肝病的临床与基础研究.
基金项目: 国家自然科学基金资助项目, No. 30371288; 北京市自然科学基金项目, No. 5042024.
通讯作者: 成军, 100011, 北京市东城区安外大街地坛公园13号, 北京地坛医院传染病研究所. cj@genetherapy.com.cn
电话: 010-64481639 传真: 010-64281540
收稿日期: 2006-01-06
修回日期: 2006-01-19
接受日期: 2006-01-25
在线出版日期: 2006-05-28
Abstract

目的: 克隆HBeAg结合蛋白未知功能新基因HBeBP4的剪切体基因HBeBP4A, 构建其真核表达载体, 并应用生物信息学初步探讨其结构及功能.

方法: 应用PCR技术从HepG2细胞提取的cDNA扩增HBeBP4基因的剪切体基因HBeBP4A, 选用pGEM-Teasy载体进行TA克隆, 通过PCR, 限制性酶切分析及测序进行鉴定, 再将其亚克隆到真核表达载体pcDNATM3.1/myc-HisA, 通过PCR, 限制酶切分析进行鉴定, 并应用生物信息学初步分析其物理化学性质, 蛋白质结构和功能.

结果: 成功扩增出HBeBP4剪切体基因, 命名为HBeBP4A. 利用生物信息学分析推定其ORF为1104个核苷酸(nt), 编码产物为367个氨基酸残基(aa).

结论: 发现了HBeAg结合蛋白4(HBeBP4)基因的剪切体HBeBP4A, 构建了pcDNATM3.1/myc-HisA真核表达载体.

Keywords: 乙型肝炎病毒e抗原; 结合蛋白; 克隆化; 剪切体; 真核表达载体